松鼠葡萄球菌染料法熒光定量PCR試劑盒

商品屬性

檢測(cè)原理

采用SYBR Green染料法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對(duì)松鼠葡萄球菌基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物。通過熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)核酸擴(kuò)增過程，實(shí)現(xiàn)定性及定量分析，靈敏度可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)。

試劑盒組成

核心組分：

預(yù)混擴(kuò)增液（含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等）

松鼠葡萄球菌特異性引物混合物

熒光PCR專用模板稀釋液

陽性對(duì)照（部分型號(hào)提供）

可選配置：

陰性對(duì)照（需單獨(dú)說明）。

操作步驟

樣本準(zhǔn)備：提取待測(cè)樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。

反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）：

預(yù)混液10μL + 引物混合物2μL + 模板DNA 2μL + 無核酸酶水補(bǔ)至20μL。

PCR程序（示例）：

預(yù)變性：95℃ 5分鐘；

擴(kuò)增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循環(huán)，采集熒光信號(hào)）；

熔解曲線分析：60℃~95℃（可選）。

性能參數(shù)

特異性：與相近菌種無交叉反應(yīng)。

線性范圍：定量檢測(cè)時(shí)覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)（如10^1~10^5 copies/μL）。

重復(fù)性：CV值≤5%。

注意事項(xiàng)

避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。

實(shí)驗(yàn)環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。

熔解曲線分析建議用于結(jié)果驗(yàn)證。

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