產(chǎn)品概述
本試劑盒采用SYBR Green I染料法熒光定量技術(shù)，專為梅恩君病毒（Mayne virus）RNA檢測設(shè)計(jì)，整合反轉(zhuǎn)錄（RT）與實(shí)時定量PCR（qPCR）于單管反應(yīng)體系，實(shí)現(xiàn)高效、高靈敏度的核酸定量分析。適用于臨床樣本、環(huán)境監(jiān)測及科研領(lǐng)域的病毒載量檢測。
產(chǎn)品名稱 | 梅恩君病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Main Drain Virus (MDV) Dye-based qRT-PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR3983 |
產(chǎn)品組分
2× Advanced SG Buffer：含優(yōu)化緩沖液與SYBR Green I染料，支持單管RT-qPCR反應(yīng)。
UH Enzyme Mix：耐熱反轉(zhuǎn)錄酶（Hifair? V）與熱啟動Taq DNA聚合酶（UNICON? HotStart）預(yù)混，確保高擴(kuò)增效率。
RNase-free H?O：無核酸酶水，用于反應(yīng)體系配制。
陽性對照：非傳染性梅恩君病毒DNA片段（1×10?拷貝/μL），用于標(biāo)準(zhǔn)曲線制備與質(zhì)控。
技術(shù)參數(shù)
靈敏度：可檢測低至0.1 pg病毒RNA（高表達(dá)靶標(biāo)）或1 pg（中等表達(dá)靶標(biāo)）。
特異性：引物針對梅恩君病毒保守區(qū)設(shè)計(jì)，無交叉反應(yīng)。
線性范圍：定量檢測覆蓋5個數(shù)量級（102–10?拷貝/μL）。
穩(wěn)定性：預(yù)混液在4℃下可保存24小時，性能無顯著變化。
操作流程
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：
將陽性對照按10倍梯度稀釋（102–10?拷貝/μL），獨(dú)立操作以避免污染。
反應(yīng)體系配制（20 μL/反應(yīng)）：
10 μL 2× SG Buffer
0.5 μL UH Enzyme Mix
1 μL 模板RNA
8.5 μL RNase-free H?O
程序設(shè)置：
反轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘 → 預(yù)變性：95℃ 5分鐘 → PCR擴(kuò)增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循環(huán)） → 熔解曲線分析。
注意事項(xiàng)
操作需在無核酸污染環(huán)境下進(jìn)行，建議使用帶濾芯槍頭。
陽性對照僅用于實(shí)驗(yàn)質(zhì)控，不可替代臨床樣本。
熔解曲線需呈現(xiàn)單一峰，以確認(rèn)擴(kuò)增特異性。
應(yīng)用支持
兼容主流熒光定量PCR儀（含No Rox/Low Rox/High Rox平臺）。
提供技術(shù)驗(yàn)證數(shù)據(jù)（如擴(kuò)增效率≥90%，R2≥0.99）。
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關(guān)鍵字： 梅恩君病毒;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的產(chǎn)品品牌。
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