產(chǎn)品概述
本試劑盒采用熒光染料法（SYBR Green I）定量檢測(cè)泰澤隱孢子蟲（Cryptosporidium tyzzeri）DNA，適用于科研及臨床樣本的快速、高靈敏度檢測(cè)。染料法通過特異性引物擴(kuò)增目標(biāo)序列，SYBR Green嵌入雙鏈DNA后釋放熒光信號(hào)，結(jié)合實(shí)時(shí)PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 泰澤隱孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Cryptosporidium tyzzeri Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR4195 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：可檢測(cè)低至1.5 μg/ml的DNA濃度，線性范圍廣（1.5–24 μg/ml）。
操作簡(jiǎn)便：即開即用，用戶僅需提供DNA模板。
成本優(yōu)化：相比探針法，染料法無需合成特異性探針，降低實(shí)驗(yàn)成本。
穩(wěn)定性：-20℃保存，低溫運(yùn)輸確保試劑活性。
組分清單
熒光定量PCR預(yù)混液（含SYBR Green I、dNTPs、Taq酶）
泰澤隱孢子蟲特異性引物
標(biāo)準(zhǔn)品（原倍濃度24 μg/ml）
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
陰性對(duì)照
說明書
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋
按以下梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品（示例）：
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（24 μg/ml）：150 μl原液 + 150 μl稀釋液 → 12 μg/ml（4號(hào)）
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品（12 μg/ml）：同上操作 → 6 μg/ml（3號(hào)）
依次稀釋至1.5 μg/ml（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）。
2. 加樣與擴(kuò)增
標(biāo)準(zhǔn)孔：加入50 μl梯度標(biāo)準(zhǔn)品。
樣品孔：先加40 μl稀釋液，再加10 μl待測(cè)DNA（終稀釋5倍）。
PCR程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（熒光采集）
3. 數(shù)據(jù)分析
熒光閾值（Threshold）設(shè)定為基線信號(hào)（前15循環(huán)）的10倍標(biāo)準(zhǔn)差。
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中目標(biāo)DNA濃度。
注意事項(xiàng)
避免反復(fù)凍融試劑，分裝后保存。
加樣時(shí)避免氣泡，確保孔底覆蓋。
實(shí)驗(yàn)需在潔凈環(huán)境下操作，防止污染。
技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)方法：SYBR Green I熒光染料法
規(guī)格：50次反應(yīng)
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
適用儀器：兼容主流熒光定量PCR儀（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。
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關(guān)鍵字： 泰澤隱孢子蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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