肺孢子蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 肺孢子蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Pneumocystis spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4336 |
檢驗原理
本試劑盒基于SYBR Green染料法熒光定量PCR技術，針對肺孢子蟲高度保守基因區(qū)域設計特異性引物。通過實時監(jiān)測PCR擴增過程中的熒光信號，實現對目標核酸的定性和定量分析。
試劑組成
擴增液：50μL ×1管
反應液：950μL ×1管
陽性質控品（1×10^8拷貝/μL）：50μL ×1管
陰性質控品：50μL ×1管
說明書：1份
注：
不同批號組分不可混用。
部分提供預混試劑（如PCR MagicMix 3.0）及引物混合液（詳見具體包裝）。
儲存及有效期
儲存條件：-20℃±5℃避光保存，避免反復凍融（≤7次）。
有效期：12個月。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀，包括：
ABI 系列（如7500、StepOnePlus）
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf Mastercycler
樣本要求
樣本類型：胃液分泌物、呼吸道樣本或培養(yǎng)物（需符合《臨床微生物樣本采集規(guī)范》）。
保存與運輸：
短期保存：-20℃；長期保存：-70℃（≤6個月）。
運輸需使用2~8℃冰袋，禁止反復凍融。
操作步驟
1. 樣本處理
DNA提?。菏褂脽o核酸酶污染的提取試劑盒，避免交叉污染。
2. 陽性對照稀釋（以10^2-10^7拷貝/μL梯度為例）
按10倍梯度稀釋陽性質控品，獨立操作以防污染。
3. PCR反應體系
每反應體系20μL，含模板DNA、擴增液、反應液及引物混合液（具體比例參考說明書）。
4. 擴增程序
預變性：95℃ 5分鐘 → 擴增循環(huán)（95℃ 10秒，60℃ 30秒，40循環(huán)） → 熔解曲線分析。
結果判讀
定性：Ct值≤35且熔解曲線峰值單一判為陽性。
定量：通過標準曲線計算拷貝數（線性范圍10^2-10^7拷貝/μL）。
注意事項
實驗分區(qū)操作（樣本處理區(qū)、PCR準備區(qū)、擴增區(qū)）。
使用濾芯吸頭及無核酸酶耗材。
陽性質控品為DNA片段，非活體病原體。
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關鍵字： 肺孢子蟲通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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