禽腺病毒（IV型）探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 禽腺病毒（IV型）探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Fowl Adenovirus Type IV Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4664 |
預(yù)期用途
本試劑盒基于TaqMan探針法熒光定量PCR技術(shù)，用于禽類樣本中IV型禽腺病毒核酸的定性與定量檢測。適用于科研用途，如流行病學(xué)調(diào)查、病毒載量監(jiān)測及實驗室研究。
檢驗原理
通過設(shè)計針對IV型禽腺病毒基因保守區(qū)的特異性引物及探針，在PCR擴(kuò)增過程中釋放熒光信號，利用實時熒光定量PCR儀監(jiān)測信號強(qiáng)度，實現(xiàn)核酸的靈敏檢測（檢測限低至1×10^3拷貝/μL）。
試劑組成
禽腺病毒擴(kuò)增液（25μL×1管）
禽腺病毒反應(yīng)液（975μL×1管）
陽性質(zhì)控品（50μL×1管，含1×10^6拷貝/μL病毒核酸）
陰性質(zhì)控品（50μL×1管，無核酸酶水）
說明書（1份）
儲存條件及有效期
-20℃±5℃避光保存，避免反復(fù)凍融（≤7次），有效期12個月。
適用儀器
兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等熒光定量PCR儀。
自備耗材與設(shè)備
無核酸酶離心管（0.2mL PCR管、1.5mL離心管）
濾芯吸頭（10μL/200μL/1000μL）
離心機(jī)、振蕩混勻器、移液器
樣本要求
樣本類型：
活體樣本：全血、血清、糞便、呼吸道/肛門拭子。
病死禽：腸道組織、肝臟等。
保存與運輸：
短期保存：-20℃；長期保存：-70℃（≤6個月）。
運輸需使用2~8℃冰袋，避免反復(fù)凍融。
操作步驟
1. 核酸提取
推薦使用商品化病毒DNA提取試劑盒，提取后模板保存于-15℃以下。
2. 試劑配制
解凍試劑后混勻離心，按N（樣本數(shù)+2質(zhì)控）計算反應(yīng)體系：
反應(yīng)液：19.5μL/管
擴(kuò)增液：0.5μL/管
分裝至PCR管，加入5μL模板DNA（樣本/質(zhì)控）。
3. PCR擴(kuò)增
程序設(shè)置：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
擴(kuò)增循環(huán)（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（采集熒光）
4. 數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標(biāo)準(zhǔn)曲線（Ct值-log濃度）計算病毒載量。
定性檢測：
陽性：Ct≤36，典型擴(kuò)增曲線；
陰性：Ct≥40；
可疑值（36<Ct<40）：需復(fù)測確認(rèn)。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴(kuò)增需在獨立區(qū)域進(jìn)行。
防污染措施：使用一次性耗材，實驗后以10%次氯酸或75%酒精清潔臺面。
質(zhì)控要求：陰性對照Ct≥40，陽性對照Ct≤36。
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關(guān)鍵字： 禽腺病毒（IV型）;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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