阿拉斯加三文魚細(xì)胞基因組DNA殘留探針法熒光定量PCR試劑盒(不含內(nèi)參)
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 阿拉斯加三文魚細(xì)胞基因組DNA殘留探針法熒光定量PCR試劑盒(不含內(nèi)參) | 英文名稱 | Alaskan Salmon Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4797 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)開發(fā)，專用于檢測(cè)阿拉斯加三文魚（Oncorhynchus keta）細(xì)胞基因組DNA殘留。適用于科研領(lǐng)域，具有高靈敏度、高特異性及寬線性范圍（5個(gè)數(shù)量級(jí)），可滿足定性與定量分析需求。
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開即用：用戶僅需提供待測(cè)DNA模板。
高靈敏度：檢測(cè)限低至100拷貝/反應(yīng)，優(yōu)化引物設(shè)計(jì)確保信號(hào)穩(wěn)定性。
特異性強(qiáng)：靶向基因組DNA保守序列，避免與其他生物樣本交叉反應(yīng)。
質(zhì)量控制：提供陽性對(duì)照（無傳染性DNA片段），便于區(qū)分假陰性結(jié)果。
兼容性廣：適配主流熒光定量PCR儀（如ABI、Bio-Rad、LightCycler等）。
組分清單
熒光定量PCR反應(yīng)預(yù)混液（含探針、引物、dNTPs、酶等）
陽性對(duì)照（1×10^8拷貝/μL）
DEPC-H2O（陰性對(duì)照）
標(biāo)準(zhǔn)曲線稀釋液（可選）
操作流程
1. DNA提取
使用兼容的核酸提取試劑盒制備樣本DNA，建議設(shè)置陰性對(duì)照（水）和陽性對(duì)照（試劑盒提供）。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量分析需選）
按10倍梯度稀釋陽性對(duì)照（10^7~10^2拷貝/μL），獨(dú)立操作避免污染。
標(biāo)記離心管（1~6號(hào)），依次加入稀釋液并混勻，冰上保存。
3. 反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
每管加入18μL預(yù)混液，分別加入2μL模板（待測(cè)樣本、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照）。
離心后立即上機(jī)。
4. PCR擴(kuò)增程序
（具體程序需參考儀器說明書，典型條件如下）
預(yù)變性：95℃ 2分鐘
循環(huán)階段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集熒光信號(hào)）
結(jié)果判讀
定量分析：以陽性對(duì)照Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本拷貝數(shù)。
定性分析：
陽性：Ct值<35，S型擴(kuò)增曲線。
陰性：Ct值>38或無信號(hào)。
可疑（35≤Ct≤38）：需復(fù)檢確認(rèn)。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴(kuò)增需在不同區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
試劑保存：-20℃避光保存，使用前充分混勻并短暫離心。
防污染措施：使用帶濾芯槍頭，實(shí)驗(yàn)后以10%次氯酸或75%乙醇清潔臺(tái)面。
運(yùn)輸與有效期：低溫運(yùn)輸，-20℃保存有效期12個(gè)月。
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關(guān)鍵字： 阿拉斯加三文魚細(xì)胞基因組DNA殘留;探針法熒光定量 ;PCR試劑盒;
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