非洲綠猴腎細(xì)胞基因組DNA殘留探針法熒光定量PCR試劑盒(不含內(nèi)參)
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 非洲綠猴腎細(xì)胞基因組DNA殘留探針法熒光定量PCR試劑盒(不含內(nèi)參) | 英文名稱 | African Green Monkey Kidney Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4802 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于TaqMan探針法熒光定量PCR技術(shù)，專用于檢測Vero非洲綠猴腎細(xì)胞基因組DNA殘留，適用于科研領(lǐng)域中的定性或定量分析。試劑盒包含優(yōu)化的引物探針組合、陽性對照及反應(yīng)體系，靈敏度高（檢測下限達1×10^1拷貝/μL），特異性強，可有效避免與其他微生物DNA的交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品組成
| 成分 | 規(guī)格 | 主要功能 |
| 探針法qPCR緩沖液 | 500 μL | 提供反應(yīng)緩沖環(huán)境 |
| 探針法qPCR酶混合液 | 50 μL | 含熱啟動DNA聚合酶及逆轉(zhuǎn)錄酶 |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋及樣本制備 |
| PCR引物-探針干粉 | 50次反應(yīng) | 特異性擴增目標(biāo)DNA |
| PCR陽性對照（10^7拷貝/μL） | 50 μL | 標(biāo)準(zhǔn)曲線建立及質(zhì)控 |
操作流程
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
使用陽性對照進行10倍梯度稀釋（10^1–10^6拷貝/μL），獨立操作以避免污染。
標(biāo)記離心管（1–6號），依次加入稀釋液并混勻，冰上保存?zhèn)溆谩?/span>
2. 樣本DNA提取
建議使用商品化DNA提取試劑盒，設(shè)置陰性/陽性對照（N+2樣本數(shù)）。
3. qPCR反應(yīng)設(shè)置（20 μL體系）
定量分析：需檢測N+9管（含6個標(biāo)準(zhǔn)曲線點）。
定性分析：僅需檢測1個標(biāo)準(zhǔn)點（如10^4拷貝/μL）。
反應(yīng)參數(shù)：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 10 min
預(yù)變性：95℃ 10 min
擴增循環(huán)（40×）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信號）
4. 數(shù)據(jù)分析
定量：以Ct值對log濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算樣本濃度。
定性：Ct≤39為陽性，≥40為陰性，39–40間需復(fù)測。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴增需在不同區(qū)域進行，避免交叉污染。
質(zhì)量控制：
陰性對照Ct≥40，陽性對照Ct≤39且擴增曲線正常。
若結(jié)果異常，檢查提取效率或污染風(fēng)險。
保存與運輸：
試劑盒-20℃避光保存，有效期12個月；
樣本短期-20℃保存，長期需-70℃，運輸使用2–8℃冰袋。
局限性聲明：
檢測結(jié)果受樣本質(zhì)量、提取方法及操作規(guī)范影響；
不可用于臨床診斷，僅供科研用途。
適用儀器
兼容ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流熒光定量PCR儀。
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關(guān)鍵字： 非洲綠猴腎細(xì)胞基因組DNA殘留;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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