中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞基因組DNA殘留探針?lè)晒舛縋CR試劑盒(不含內(nèi)參)
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞基因組DNA殘留探針?lè)晒舛縋CR試劑盒(不含內(nèi)參) | 英文名稱 | Chinese Hamster Ovary (CHO) Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4805 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針?lè)晒舛?/span>PCR技術(shù)，專用于檢測(cè)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）基因組DNA殘留，適用于生物制藥質(zhì)量控制、細(xì)胞培養(yǎng)監(jiān)測(cè)等科研領(lǐng)域。產(chǎn)品具有高靈敏性（檢測(cè)限低至100拷貝/反應(yīng)）和特異性，可同時(shí)支持定性與定量分析，線性范圍覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)。
產(chǎn)品組成
| 編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
| 試劑一 | 探針?lè)╭PCR緩沖液 | 500 μL |
| 試劑二 | 探針?lè)╭PCR酶混合液 | 50 μL |
| 試劑三 | 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL |
| 試劑四 | PCR引物-探針干粉 | 50次反應(yīng) |
| 試劑五 | PCR陽(yáng)性對(duì)照（10^7拷貝/μL） | 50 μL |
注：含陽(yáng)性對(duì)照（無(wú)傳染性DNA片段），不含內(nèi)參基因。
操作流程
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
稀釋步驟：以10倍梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照（10^1–10^6拷貝/μL），需在獨(dú)立區(qū)域操作，避免交叉污染。
標(biāo)記6管（6–1號(hào)），每管加45 μL稀釋液，依次加入5 μL上一步稀釋液，渦旋混勻后冰上保存。
2. 樣本DNA制備
建議設(shè)置陰性對(duì)照（NC，水）和陽(yáng)性對(duì)照（PC，陽(yáng)性稀釋液）。
兼容多數(shù)商業(yè)DNA提取試劑盒，需確保樣本純度。
3. qPCR反應(yīng)體系（20 μL）
定量分析：需設(shè)置N+9個(gè)反應(yīng)管（樣本、陰性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)曲線）。
循環(huán)條件：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 10 min（若需）；
預(yù)變性：95℃ 10 min；
40循環(huán)：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信號(hào)）。
4. 數(shù)據(jù)分析
定量：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計(jì)算樣本濃度。
定性：Ct≤39為陽(yáng)性，≥40為陰性，39–40間需復(fù)測(cè)。
性能參數(shù)
靈敏度：100拷貝/反應(yīng)。
特異性：不與常見(jiàn)微生物DNA交叉反應(yīng)。
線性范圍：10^1–10^6拷貝/μL。
保存與運(yùn)輸
保存：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
運(yùn)輸：2–8℃冰袋運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)域進(jìn)行。
防污染措施：使用帶濾芯槍頭、專用工作服，實(shí)驗(yàn)后以10%次氯酸或75%酒精清潔臺(tái)面。
質(zhì)量控制：每次實(shí)驗(yàn)需包含陰/陽(yáng)性對(duì)照，排除假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。
局限性：結(jié)果可能受樣本處理、提取效率、運(yùn)輸條件等因素影響，建議結(jié)合其他檢測(cè)方法驗(yàn)證。
聲明
本產(chǎn)品僅用于科研，不適用于臨床診斷。實(shí)驗(yàn)操作需符合實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范。
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關(guān)鍵字： 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞基因組DNA殘留;探針?lè)晒舛?PCR試劑盒;
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