人源性成分DNA探針法熒光定量PCR試劑盒(不含內(nèi)參)

商品屬性

產(chǎn)品概述

本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術(shù)，專為人源性成分DNA檢測(cè)設(shè)計(jì)，適用于科研領(lǐng)域的定性或定量分析。試劑盒采用優(yōu)化引物及探針，確保高靈敏度和特異性，避免與其他生物樣本的DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

產(chǎn)品特點(diǎn)

即開即用：用戶僅需提供DNA模板，無需額外配制主反應(yīng)液。

高靈敏度：檢測(cè)下限可達(dá)50拷貝/反應(yīng)，線性范圍覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)。

特異性強(qiáng)：引物針對(duì)人源性DNA高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，避免非特異性擴(kuò)增。

防污染設(shè)計(jì)：提供無傳染性陽性對(duì)照片段，便于區(qū)分假陰性結(jié)果。

靈活應(yīng)用：支持絕對(duì)定量（需標(biāo)準(zhǔn)曲線）或定性檢測(cè)（Ct值判讀）。

兼容性廣：與多數(shù)核酸提取試劑兼容，推薦配套使用柱式提取試劑或免提取釋放劑。

試劑盒組分

探針法qPCR緩沖液（500 μL）

qPCR酶混合液（100 μL）

熒光PCR模板稀釋液（1 mL）

人源性成分引物-探針混合液（150 μL）

陽性對(duì)照（50 μL，1×10^7拷貝/μL）

使用說明書（1份）

操作步驟

DNA提取

使用自選方法或配套核酸提取試劑純化樣本DNA，建議設(shè)置陰性對(duì)照（水）和陽性對(duì)照（試劑盒提供）。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測(cè)需選）

標(biāo)記6管，依次加入45 μL稀釋液。

梯度稀釋陽性對(duì)照（10^7拷貝/μL起始），依次獲得10^6至10^1拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)品。

所有操作需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免污染。

qPCR反應(yīng)體系（20 μL體系）

配制反應(yīng)液：按樣本數(shù)（N）準(zhǔn)備N+8管（含陰性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)曲線管）。

每管加入18 μL主反應(yīng)液，2 μL模板（樣本/對(duì)照）。

加樣順序：陰性對(duì)照→待測(cè)樣本→陽性對(duì)照。

擴(kuò)增程序

預(yù)變性：95℃ 5分鐘

擴(kuò)增循環(huán)（40輪）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（熒光采集）

（具體程序請(qǐng)參考儀器型號(hào)調(diào)整）

數(shù)據(jù)分析

定量檢測(cè)：以標(biāo)準(zhǔn)品Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本濃度。

定性檢測(cè)：

陽性：Ct ≤ 36，擴(kuò)增曲線呈S型。

陰性：Ct ≥ 40或無Ct值。

灰區(qū)（36 < Ct < 40）：需復(fù)測(cè)確認(rèn)。

注意事項(xiàng)

分區(qū)操作：樣本制備、試劑配制、擴(kuò)增需在不同區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。

質(zhì)量控制：每次實(shí)驗(yàn)需包含陰/陽性對(duì)照。

保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月；陽性對(duì)照單獨(dú)存放。

安全規(guī)范：實(shí)驗(yàn)后使用10%次氯酸或75%乙醇清潔臺(tái)面及移液器。

運(yùn)輸與儲(chǔ)存

運(yùn)輸：低溫干冰運(yùn)輸。

儲(chǔ)存：-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

適用范圍聲明

本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷或其他用途。

公司正在出售的產(chǎn)品