產(chǎn)品原理
本試劑盒基于實時熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)，采用特異性探針與靶基因保守序列雜交，通過熒光信號積累實時監(jiān)測擴增進程，實現(xiàn)對薤白（Bulbus allii macrostemonis）DNA的定性或定量檢測。探針法具有高特異性，可有效避免非特異性擴增。
產(chǎn)品名稱 | 薤白探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Bulbus Allii Macrostemi Probe-based PCR Identification Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4935 |
產(chǎn)品特點
高特異性：引物及探針針對薤白高度保守區(qū)設計，經(jīng)生物信息學驗證，無交叉反應。
高靈敏度：最低檢測限達103拷貝/μL，無需預增菌。
即開即用：預混反應液含酶、dNTPs、緩沖液等，僅需加入模板DNA。
雙重對照：提供陽性對照（無傳染性DNA片段）和陰性對照（水），確保結(jié)果可靠性。
應用范圍：適用于組織、細胞、藥材等樣本的薤白成分鑒定及含量分析。
實驗步驟
1. 樣本制備
DNA提?。菏褂弥椒ɑ蛟噭┖刑崛颖綝NA，建議濃度≥10 ng/μL。
對照設置：
陽性對照：試劑盒提供的標準DNA片段（10?拷貝/μL，需梯度稀釋）。
陰性對照：無核酸酶水。
2. 標準曲線制備（定量分析需選）
將陽性對照按10倍梯度稀釋（10?~102拷貝/μL），每個濃度重復3次。
3. qPCR反應體系（20μL）
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Probe Master Mix | 10 |
| 引物探針混合液 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| 無核酸酶水 | 補足至20 |
4. 反應程序
預變性：95℃ 3分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（采集熒光），共40循環(huán)。
5. 數(shù)據(jù)分析
定量分析：根據(jù)標準曲線計算樣本拷貝數(shù)。
定性分析：Ct值≤36為陽性，≥40為陰性，36~40需復測。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴增需在不同區(qū)域進行，避免污染。
防污染措施：使用帶濾芯槍頭，實驗臺用10%次氯酸或75%乙醇消毒。
試劑解凍：使用前充分混勻并短暫離心，避免反復凍融。
結(jié)果判讀：陰性對照Ct值應≥40，陽性對照Ct值≤36且擴增曲線典型。
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關(guān)鍵字： 薤白;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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