產(chǎn)品用途
用于白蘞（Ampelopsis japonica）的種源性基因檢測，僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 白蘞探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Radix Ampelopsis Probe-based PCR Identification Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR5203 |
技術(shù)原理
基于實時熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)，通過探針法檢測靶序列：
探針設(shè)計：5'端標(biāo)記熒光報告基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。擴(kuò)增時Taq酶切割探針，釋放熒光信號，通過熒光強(qiáng)度變化定量分析目標(biāo)DNA。
檢測流程：包括反轉(zhuǎn)錄（若檢測RNA）、PCR擴(kuò)增和實時熒光信號采集。
產(chǎn)品組成
以50T規(guī)格為例，主要成分包括：
試劑一：探針法qRT-PCR緩沖液（500μL）
試劑二：酶混合液（100μL）
試劑三：熒光PCR模板稀釋液（1mL）
試劑四：白蘞特異性引物混合液（100μL）
試劑五：熒光探針（50μL）
試劑六：陽性對照（1×10^8拷貝/μL，50μL）
說明書：1份
儲存與運輸
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月。
運輸條件：低溫運輸（冰袋或干冰）。
實驗步驟
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：
將陽性對照按10倍梯度稀釋（10^2~10^7拷貝/μL），用于定量分析。
樣本制備：
提取待測樣本RNA/DNA，建議設(shè)置陰/陽性對照。
PCR反應(yīng)體系（20μL/反應(yīng)）：
| 成分 | 體積（μL） |
| qRT-PCR緩沖液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 探針 | 1 |
| 引物混合液 | 2 |
| 模板RNA/DNA | 5 |
反應(yīng)程序：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 30分鐘（若需）
預(yù)變性：94℃ 10分鐘
擴(kuò)增循環(huán)（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集FAM通道信號）
數(shù)據(jù)分析
定量檢測：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本拷貝數(shù)。
定性檢測：
Ct值≤35為陽性，≥40為陰性；35~40需復(fù)測。
陰性對照Ct值應(yīng)≥40，陽性對照Ct值≤30。
注意事項
操作需在獨立區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
自備RNA提取試劑及無核酸酶耗材。
不同試劑盒組分可能略有差異，請以實際產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。
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關(guān)鍵字： 白蘞;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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