產品概述

本試劑盒采用實時熒光定量PCR（qPCR）探針法技術，專用于白芷（Radix Angelicae Dahuricae）的快速、高特異性分子鑒定。試劑盒包含預混反應體系，適用于DNA模板的定性及定量分析，具有高靈敏度（檢測下限達1×10^2拷貝/μL）和特異性（針對白芷保守基因序列設計），可有效避免交叉反應。

產品組成

探針法qRT-PCR緩沖液（500 μL）

探針法qRT-PCR酶混合液（100 μL）

熒光PCR專用模板稀釋液（1 mL）

白芷特異性引物混合液（100 μL）

白芷qPCR探針（50 μL，FAM標記）

陽性對照（1×10^8拷貝/μL，50 μL）

說明書（1份）

保存條件

-20℃避光保存，有效期12個月。避免反復凍融，運輸需低溫條件。

實驗流程

標準曲線制備

將陽性對照按10倍梯度稀釋（10^7~10^2拷貝/μL），每個梯度單獨操作以避免污染。

樣本制備

提取待測樣本DNA（推薦柱式提取法），建議設置陰/陽性質控（水及陽性對照稀釋液）。

反應體系配置（20 μL/反應）

| 成分 | 體積（μL） |

| qRT-PCR緩沖液 | 10 |

| 酶混合液 | 2 |

| 探針 | 1 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板DNA/標準品/對照 | 5 |

PCR程序

逆轉錄：50℃ 30 min（若檢測RNA）；預變性：94℃ 10 min；擴增：40循環(huán)（94℃ 15 sec → 60℃ 1 min，采集FAM信號）。

數據分析

定量分析：以標準品log拷貝數為橫軸、Ct值為縱軸繪制曲線，計算樣本濃度。

定性判定：陰性對照Ct≥40；陽性對照Ct≤36且有典型擴增曲線；樣本Ct≤36判為陽性，≥40為陰性，36~40需復測。

注意事項

分區(qū)操作（樣本處理、試劑配制、擴增區(qū)），避免氣溶膠污染。

使用無核酸酶耗材，反應體系避光配制。

探針避光保存，避免反復凍融。

本產品僅限科研用途。

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