霍山石斛探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 霍山石斛探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Dendrobium huoshanense Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4823 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于TaqMan探針法熒光定量PCR技術(shù)，專用于霍山石斛（Dendrobium huoshanense）的特異性檢測。通過針對霍山石斛保守基因區(qū)域設(shè)計的引物和探針，可實現(xiàn)高靈敏、高特異的核酸定量或定性分析，適用于藥材真?zhèn)舞b別、科研檢測等場景。
產(chǎn)品特點
即開即用：用戶僅需提供待測DNA模板。
高特異性：引物及探針經(jīng)優(yōu)化設(shè)計，可有效區(qū)分霍山石斛與其他近緣物種（如鐵皮石斛、齒瓣石斛）。
內(nèi)控設(shè)計：含陽性對照（無傳染性DNA片段），避免假陰性干擾。
閉管操作：一管式反應(yīng)體系，降低交叉污染風(fēng)險。
雙重用途：支持定性和定量檢測，定量線性范圍達5個數(shù)量級（10^2~10^7拷貝/μL）。
適配性廣：兼容主流熒光定量PCR儀（ABI、Bio-Rad、LightCycler等）。
包裝規(guī)格
| 成分 | 規(guī)格 |
| 2×Probe qPCR預(yù)混液 | 500 μL（-20℃避光保存） |
| 熒光PCR專用稀釋液 | 1 mL |
| 霍山石斛qPCR引物混合液 | 100 μL |
| 霍山石斛qPCR探針 | 50 μL（棕色管避光保存） |
| 陽性對照（1×10^8拷貝/μL） | 50 μL |
| 使用說明書 | 1份 |
保存與運輸
儲存條件：-20℃避光保存，有效期12個月，避免反復(fù)凍融（≤7次）。
運輸方式：低溫冰袋運輸，確保試劑穩(wěn)定性。
實驗步驟
1. 標準曲線制備（以10倍梯度稀釋為例）
標記離心管（7~2號），依次加入45 μL稀釋液，從陽性對照（10^8拷貝/μL）開始梯度稀釋至10^2拷貝/μL，每步更換槍頭并充分震蕩。
2. 樣本DNA提取
建議使用商品化DNA提取試劑盒，設(shè)置陰性對照（水）和陽性對照（稀釋后的陽性DNA）。
3. PCR反應(yīng)體系（20 μL/管）
| 成分 | 樣品管/陽性對照 | 陰性對照（水） |
| 2×Probe qPCR預(yù)混液 | 10 μL | 10 μL |
| qPCR探針 | 1 μL | 1 μL |
| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL |
| 待測DNA/標準品/水 | 7 μL | 7 μL |
4. PCR程序
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
40循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集FAM通道信號）。
5. 數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標準曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計算樣本濃度。
定性檢測：陰性對照Ct≥40；陽性對照Ct≤30；樣本Ct≤35判為陽性，≥40為陰性，35~40需復(fù)測。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、PCR擴增需在不同區(qū)域進行。
防污染措施：使用帶濾芯槍頭，避免氣溶膠污染。
試劑解凍：使用前充分混勻并短暫離心，避免強光直射探針。
質(zhì)量控制：每次實驗需包含陰/陽性對照。
適用范圍：科研用途，不適用于臨床診斷。
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