香菇源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 香菇源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Shiitake Mushroom-derived Component Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4825 |
產(chǎn)品基本信息
規(guī)格：50次/盒（20μL或40μL反應(yīng)體系）
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月。
適用樣本：香菇干貨、菌粉、食用菌制品、調(diào)味品等。
產(chǎn)品特點
高特異性：針對香菇保守序列設(shè)計的引物與探針，避免與其他物種DNA交叉反應(yīng)。
高靈敏度：檢測限低至100拷貝/反應(yīng)（探針法）。
即開即用：預(yù)混MasterMix及優(yōu)化引物-探針體系，用戶僅需提供DNA模板。
質(zhì)控完善：含陽性對照（1×10?拷貝/μL），支持標(biāo)準(zhǔn)曲線定量（線性范圍≥5個數(shù)量級）。
多功能性：支持定性與定量檢測，適配常規(guī)熒光定量PCR儀。
試劑盒組成
核心組分：
2×Probe qPCR MasterMix
香菇源性成分特異性引物-探針干粉
熒光PCR專用模板稀釋液
陽性對照（1×10?拷貝/μL）
超純水（無核酸酶）
需自備試劑：樣本DNA提取試劑、核酸純化試劑盒、離心管及帶濾芯吸頭。
實驗流程
樣本DNA制備：
提取樣本DNA，建議A260/A280純度1.8-2.0。
標(biāo)準(zhǔn)曲線稀釋（示例）：
將陽性對照按10倍梯度稀釋（10?~102拷貝/μL），獨立操作避免污染。
PCR反應(yīng)體系：
按說明書配制20μL體系（含MasterMix、引物-探針、模板DNA）。
擴增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；擴增循環(huán)：95℃ 10秒→60℃ 30秒（40循環(huán)，采集熒光）。
結(jié)果分析：
定量：通過Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本拷貝數(shù)。
定性：Ct≤36為陽性，≥40為陰性，36-40需復(fù)測。
注意事項
操作規(guī)范：
分區(qū)操作（樣本制備、PCR配制、擴增區(qū)），使用帶濾芯吸頭。
避免反復(fù)凍融試劑，陽性對照單獨存放。
應(yīng)用限制：僅限科研用途，不可用于臨床診斷或食品合規(guī)檢測。
疑難處理：
無擴增樣本建議稀釋后復(fù)測，排除抑制劑干擾。
標(biāo)準(zhǔn)曲線R2需≥0.98，否則需重新標(biāo)定。
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關(guān)鍵字： 香菇源性成分;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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