產(chǎn)品介紹:
驢源性成分(Don)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)是一種基于TaqMan探針技術(shù)的高特異性檢測工具,通過實時監(jiān)測熒光信號實現(xiàn)對食品、飼料及藥品中驢源性成分的精準鑒定,檢出限可達0.1%,特別適用于阿膠制品真實性驗證和肉類摻假檢測。
產(chǎn)品名稱 | 驢源性成分(Don)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) | 貨號 | AP3916 |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR | 規(guī)格 | 50T |
一、檢測原理與技術(shù)特點
該試劑盒采用TaqMan探針法實時熒光PCR技術(shù),針對驢源性成分特異性基因(如線粒體DNA的D-loop區(qū)或ND5基因)設(shè)計引物和熒光探針。在PCR擴增過程中,當探針與目標DNA序列結(jié)合后,聚合酶在延伸時會降解探針,釋放出FAM熒光信號,通過實時監(jiān)測熒光強度變化,可實現(xiàn)對驢源性成分的定性檢測。部分高端試劑盒采用雙重或三重熒光PCR技術(shù),可同時檢測驢、馬、牛等多種動物源性成分,顯著提高檢測效率。
二、產(chǎn)品性能與規(guī)格
性能指標 參數(shù)說明
檢測方法 實時熒光PCR法(TaqMan探針法)
檢測限 通常為0.1%(質(zhì)量分數(shù)),部分高靈敏度產(chǎn)品可達0.01%
特異性 專一性檢測驢源性成分,不與馬、牛、豬等其他畜禽物種發(fā)生交叉反應
規(guī)格 48T/盒、50T/盒(不同品牌規(guī)格略有差異)
保存條件 -20℃±5℃避光保存,避免反復凍融
有效期 12個月(不同品牌可能存在差異)
適用儀器 ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LightCycler等實時熒光PCR儀
三、操作流程與結(jié)果判讀
核心操作步驟
樣本處理:取0.1g均勻樣品,采用液氮研磨或均質(zhì)器均質(zhì),使用磁珠法或離心柱法提取DNA
加樣:向反應管中加入5μL提取的DNA模板,蓋緊管蓋,避免氣泡
試劑配制:將反應液與酶液按比例混合,分裝至PCR反應管
加樣:向反應管中加入5μL提取的DNA模板,蓋緊管蓋,避免氣泡
PCR擴增:使用熒光定量PCR儀,設(shè)置基線循環(huán)6-15,閾值設(shè)為陰性對照信號10倍
推薦PCR擴增程序
步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時間 熒光收集
預變性 1 cycle 95℃ 2-10 min 否
變性 40-45 cycles 95℃ 15 sec 否
退火/延伸 40-45 cycles 60℃ 30-60 sec 是
結(jié)果判讀標準
陽性:Ct值≤35,擴增曲線呈典型"S"型
陰性:Ct值>35或無Ct值,曲線為直線或輕微斜線
無效檢測:陰性對照出現(xiàn)擴增曲線或陽性對照無擴增曲線
四、應用場景與質(zhì)量控制
主要應用場景
食品真實性驗證:檢測宣稱"純驢肉"或"阿膠"產(chǎn)品中是否摻入其他動物成分
藥品質(zhì)量控制:確保阿膠等傳統(tǒng)藥材原料真實性(藥典規(guī)定阿膠必須采用驢皮熬制)
飼料安全監(jiān)測:防范飼料中非法添加驢源性成分
進出口檢驗:滿足國際貿(mào)易中動物源性成分標識要求
質(zhì)量控制要點
必須設(shè)置陰陽性對照:每次實驗需包含陰性對照(NTC)和陽性對照(PTC)
嚴格分區(qū)操作:試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)物理隔離,避免交叉污染
使用無核酸酶耗材:采用帶濾芯吸頭,不同區(qū)域使用獨立工具
樣本保存:避免反復凍融,運輸時2-8℃冰袋保存
五、相關(guān)標準與注意事項
現(xiàn)行相關(guān)標準
GB/T 38164-2019《常見畜禽動物源性成分檢測方法 實時熒光PCR法》
GB/T 21107-2025《飼料中馬、驢源性成分的測定》,2026-01-01實施,代替GB/T 21107-2007
國家標準計劃20255557-Z-469《分子生物標志物分析 動物源性制品中源性成分檢測 實時熒光PCR法 第7部分:驢DNA檢測方法》,等同采用ISO/TS 20224-7:2020311
檢測方法局限性
當樣本中驢源性成分含量低于檢出限(如低于0.1%)時,可能會產(chǎn)生假陰性結(jié)果
樣本在采集、運輸、儲存過程中操作不當易造成DNA降解,產(chǎn)生假陰性
實驗過程中若發(fā)生交叉污染,則容易得到假陽性結(jié)果
公司正在出售的產(chǎn)品:
羧基端小結(jié)構(gòu)域磷酸酶1抗體 | human TCR γ/δ/APC PE標記人TCR γ/δ單克隆抗體 |
2-萘甲酸抗體 | RNA結(jié)合蛋白17抗體 |
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Tenascin C 細胞粘合素/腱糖蛋白-C/固生蛋白抗體 | 人超敏C反應蛋白(hs-CRP)核酸檢測試劑盒 |
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AADAC 芳香乙酰胺脫乙?;缚贵w | 大鼠泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)PCR檢測試劑盒 |
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聚磷酸肌醇磷酸酶4B抗體 | 人幾丁質(zhì)酶1(殼三糖酶)(CHIT1)核酸檢測試劑盒 |
小鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)核酸檢測試劑盒 | 驢源性成分(Don)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)高鐵血紅蛋白MetHb測試盒 100T/96樣 50T/48樣 比色法 |
大鼠抗心肌抗體(AMA)PCR檢測試劑盒 | 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)PCR檢測試劑盒 |
人GTP酶NRas(NRAS)PCR檢測試劑盒 | 魚催乳素(PRL/LTH)核酸檢測試劑盒 |
注意事項
實驗操作規(guī)范
嚴格分區(qū)操作:試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)需物理隔離,防止氣溶膠污染。
每次實驗需設(shè)置陰性對照(無模板DNA)、陽性對照(已知PAT基因樣本)及空白對照(僅緩沖液)。
加樣時避免過量或不足,推薦低容量反應管以提高熱傳導率。
污染防控
定期監(jiān)測實驗室空氣、加樣槍及儀器表面污染,可通過擦拭采樣后擴增驗證。
擴增產(chǎn)物需在專用區(qū)域處理,避免開蓋時形成氣溶膠污染。
關(guān)鍵字: 驢源性成分 ;Don ; 熒光PCR法;核酸檢測試劑盒;
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