細胞簡介：
人腦微血管內(nèi)皮分離自腦組織；腦微血管內(nèi)皮細胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，能夠限制可溶性物質(zhì)和細胞等從血液進入大腦，大腦微血管內(nèi)皮細胞與外周內(nèi)皮細胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細胞相同，大腦微血管內(nèi)皮細胞表面表達細胞粘附分子，調(diào)控白細胞進入大腦。由于微血管內(nèi)皮細胞的器官特異性，內(nèi)皮細胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下：①腦微血管內(nèi)皮細胞存在許多細胞間緊密連接，產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗，延遲細胞旁的通量；②腦微血管內(nèi)皮細胞缺乏內(nèi)皮細胞的窗孔結(jié)構(gòu)，其液相物質(zhì)胞飲水平較低；③腦微血管內(nèi)皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運系統(tǒng)，從而產(chǎn)生“兩極分化”的表現(xiàn)型。
產(chǎn)品名稱 | 人腦微血管內(nèi)皮細胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Human Brain Microvascular Endothelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 |
貨號 | XG-X4711 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱 人腦微血管內(nèi)皮細胞
組織來源 腦組織
默認種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 公司實驗室分離的人腦微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的人腦微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
人腦微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)步驟：
組織塊培養(yǎng)法
取材與剪切
在無菌條件下取出組織，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、結(jié)締組織等非目標成分。
用眼科剪將組織剪切成 0.5-1 mm3 的小塊。
接種
用吸管將組織塊均勻地貼附在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面，各組織塊之間保持一定間距（約0.5 cm）。
吸去多余液體，將培養(yǎng)器皿翻轉(zhuǎn)，放入 37℃、5% CO? 的培養(yǎng)箱中，靜置 1-3小時，讓組織塊牢固貼壁。
加液培養(yǎng)
待組織塊貼壁后，輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，從一側(cè)緩慢加入足量的培養(yǎng)液，使組織塊浸沒在液體中，注意不要讓液體直接沖擊組織塊，以免沖起。
繼續(xù)在培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。通常 3-5天 后可觀察到細胞從組織塊邊緣長出。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠虹膜色素上皮細胞 Mouse Iris Pigment Epithelial Cells | AF750標記的乳鐵蛋白抗體 |
sh-sy5y轉(zhuǎn)染突變型人神經(jīng)母細胞瘤細胞 | 細菌苯丙脫氨基檢測試劑盒 |
豆制品維生素U（S-Methylmethionine）比色法定量檢測試劑盒 | 酵母氫/鉀ATP酶（H＋/K＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 |
載玻片細胞IGF 蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 | VEGF蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 |
組織牛病毒性腹瀉病毒II型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -2；BVDV-2）定性基因檢測試劑盒 | β-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體 |
原生質(zhì)酵母細胞轉(zhuǎn)化試劑盒 | KIAA0748蛋白抗體 |
鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白3抗體 | FAM150A蛋白抗體 |
谷氨酸受體3A抗體 | 地黃苷 DRehmannioside D |
轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體 | 3-羥基巴戟醌80368-74-7 |
同源盒蛋白C11抗體 | Potentillanoside1309589-79-4 |
磷酸化p21激活激酶6抗體 | 人腦微血管內(nèi)皮細胞3-阿魏酸酯-1-芥子酰基蔗糖98942-06-4 |
細胞肌酸激酶同工酶肌肉型（CK-MM）活性比色法定量檢測試劑盒 | 兔外周血單核細胞 Rabbit Peripheral Blood Monocyte Cells |
10%蛋白電泳分離預(yù)制膠溶液 | NB16細胞 |
產(chǎn)品注意事項：
無菌操作是生命線：所有操作必須在生物安全柜內(nèi)嚴格無菌進行，使用專用試劑和耗材，防止交叉污染。
消化是關(guān)鍵步驟：
控制時間：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化時，嚴格控制在1-2分鐘內(nèi)。顯微鏡下觀察到細胞變圓、邊緣松動即可終止，避免過度消化導(dǎo)致細胞損傷。
消化液選擇：部分供應(yīng)商推薦使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根據(jù)實驗室條件和細胞反應(yīng)選擇。
培養(yǎng)基與生長因子：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：推薦使用專用培養(yǎng)基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基礎(chǔ)培養(yǎng)基，需補充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/鏈霉素）。
生長因子：為促進生長，可添加VEGF、FGF等內(nèi)皮細胞生長因子。傳代后可嘗試對比培養(yǎng)（一瓶用原裝完全培養(yǎng)基，一瓶用自配培養(yǎng)基）。
細胞密度與傳代：
最佳傳代密度：建議在細胞匯合度達70%-80%時進行傳代，避免過度生長導(dǎo)致細胞狀態(tài)下降。
生長不均處理：若細胞生長不均，成島狀分布，可將細胞消化后重新打散，加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)]^。
污染監(jiān)測與處理：
定期檢查：定期觀察細胞有無支原體、細菌等污染跡象。
污染處理：若發(fā)現(xiàn)污染，需根據(jù)污染程度決定。輕度污染可嘗試用含高濃度抗生素的培養(yǎng)液反復(fù)清洗，但嚴重污染時建議棄置細胞。
關(guān)鍵字： 人腦微血管;內(nèi)皮細胞;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。