小鼠肝星狀細(xì)胞
細(xì)胞簡介 ：
小鼠肝星形分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細(xì)胞（HSC）又名肝貯脂細(xì)胞、貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等，是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞，各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細(xì)胞。正常情況下，HSC處于靜止?fàn)顟B(tài)，當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機械刺激等損傷時，HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停せ畹腍SC可通過增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建，此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細(xì)胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi)，是合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源，在肝纖維化的發(fā)生中處于重要地位。肝星形細(xì)胞是肝臟的間充質(zhì)細(xì)胞，約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群，肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu)，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外，肝星形細(xì)胞能通過合成肝細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細(xì)胞增殖和肝再生。
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 英文名稱 | Mouse Hepatic Stellate Cells |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
貨號 | XG-X5023 | 組織來源 | 肝臟組織 |
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 小鼠肝星狀細(xì)胞
英文名稱 Mouse Hepatic Stellate Cells
組織來源 肝臟組織
默認(rèn)種屬 小鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠肝星狀細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介 公司實驗室分離的小鼠肝星形采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的小鼠肝星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)操作方法：
核心特點
高度生理相關(guān)性：保留了體內(nèi)來源組織的結(jié)構(gòu)、功能和基因表達特征。
有限壽命：與無限增殖的腫瘤細(xì)胞系不同，原代細(xì)胞增殖能力有限，經(jīng)過一定次數(shù)的分裂后會進入衰老期，這更符合正常細(xì)胞的生理狀態(tài)。
異質(zhì)性：初始培養(yǎng)物通常是多種細(xì)胞類型的混合物，有時需要通過差速貼壁等方法進行純化。
操作要求高：對培養(yǎng)環(huán)境、試劑質(zhì)量和無菌操作的要求極為嚴(yán)格，培養(yǎng)難度大于永生化細(xì)胞系。
組織塊培養(yǎng)法
取材與剪切
在無菌條件下取出組織，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、結(jié)締組織等非目標(biāo)成分。
用眼科剪將組織剪切成 0.5-1 mm3 的小塊。
接種
用吸管將組織塊均勻地貼附在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面，各組織塊之間保持一定間距（約0.5 cm）。
吸去多余液體，將培養(yǎng)器皿翻轉(zhuǎn)，放入 37℃、5% CO的培養(yǎng)箱中，靜置 1-3小時，讓組織塊牢固貼壁。
加液培養(yǎng)
待組織塊貼壁后，輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，從一側(cè)緩慢加入足量的培養(yǎng)液，使組織塊浸沒在液體中，注意不要讓液體直接沖擊組織塊，以免沖起。
繼續(xù)在培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。通常 3-5天 后可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人胎盤絨毛膜細(xì)胞 Human Placental Amniotic Cells | GMS15重組腺病毒載體繁殖超級化學(xué)感受態(tài)細(xì)菌 |
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環(huán)指蛋白113A抗體 | 嗅覺受體5AP2抗體 |
分支酶GBE1抗體 | 劍葉龍血素CCochinchinenin C |
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關(guān)鍵操作技巧與注意事項：
成功的原代培養(yǎng)依賴于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)募?xì)節(jié)控制：
嚴(yán)格無菌操作：這是實驗成功的基石。所有操作需在生物安全柜中進行，試劑和耗材必須無菌。
保持靜置：細(xì)胞接種后的最初24-48小時內(nèi)，應(yīng)保持培養(yǎng)瓶絕對靜置，避免頻繁取出觀察或晃動，這有助于細(xì)胞貼壁和伸展。
優(yōu)化消化過程：
消化時間要恰到好處，過長會損傷細(xì)胞，過短則細(xì)胞分散不佳。
膠原酶對組織的損傷較小，常用于分離活性要求高的細(xì)胞；胰蛋白酶作用較強，需嚴(yán)格控制時間。
酶液應(yīng)新鮮配制，避免活性下降。
控制接種密度：原代細(xì)胞在低密度下不易存活，建議適當(dāng)提高初始接種密度，以保證細(xì)胞間的相互作用促進其生長。
定期換液：根據(jù)培養(yǎng)基顏色變化（如變黃）或每隔2-3天更換一次培養(yǎng)液，以清除代謝廢物并補充營養(yǎng)。
關(guān)鍵字： 小鼠肝;星狀細(xì)胞;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。