產(chǎn)品概述
本試劑盒基于SYBR Green I染料法，專為流行性出血熱病毒（如漢坦病毒等）的RNA檢測設計，通過一步法熒光定量RT-PCR技術實現(xiàn)高靈敏度、高特異性的核酸定量分析。適用于臨床樣本、環(huán)境監(jiān)測及科研領域的病毒載量檢測。
產(chǎn)品名稱 | 流行性出血熱病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4380 |
檢測原理
反轉錄與擴增一體化：試劑盒采用耐熱逆轉錄酶（如Hifair? V Reverse Transcriptase）和熱啟動Taq DNA聚合酶（如UNICON? HotStart Taq），在單管內(nèi)完成cDNA合成與qPCR擴增，減少操作步驟和污染風險。
熒光信號采集：SYBR Green I染料與雙鏈DNA結合后發(fā)射熒光，通過實時監(jiān)測熒光強度實現(xiàn)靶標定量。
產(chǎn)品組分
2× Advanced SG Buffer：含優(yōu)化緩沖體系、dNTPs及Mg2?。
UH Enzyme Mix：逆轉錄酶與熱啟動Taq聚合酶預混液。
RNase-free H?O：無核酸酶水。
陽性對照：非傳染性病毒核酸片段（1×10?拷貝/μL）。
技術參數(shù)
靈敏度：可檢測低至0.1 pg病毒RNA（高表達靶標）或單拷貝DNA。
線性范圍：覆蓋102–10?拷貝/μL（5個數(shù)量級）。
特異性：針對病毒高度保守區(qū)設計引物，避免交叉反應。
穩(wěn)定性：預混液在4℃下可保存24小時。
操作步驟
標準曲線制備：
將陽性對照按10倍梯度稀釋（102–10?拷貝/μL），獨立操作以避免污染。
反應體系配制（20 μL/反應）：
10 μL 2× SG Buffer
0.5 μL UH Enzyme Mix
1 μL模板RNA
8.5 μL RNase-free H?O
PCR程序：
逆轉錄：50℃ 15分鐘
預變性：95℃ 5分鐘
擴增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循環(huán)）
熔解曲線分析：60–95℃（驗證擴增特異性）。
注意事項
防污染：使用帶濾芯槍頭，分區(qū)操作。
適用性：兼容常見qPCR儀器（No/Low/High Rox平臺）。
應用限制：僅限科研或專業(yè)檢測使用。
質量控制
每批試劑盒經(jīng)靈敏度、重復性（CV<5%）及特異性驗證。
陽性對照需產(chǎn)生預期Ct值，陰性對照無擴增。
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關鍵字： 流行性出血熱病毒;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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