副溶血性弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 副溶血性弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Vibrio parahaemolyticus Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4522 |
檢驗原理
采用SYBR Green I熒光染料法，針對副溶血性弧菌保守基因序列設(shè)計特異性引物，通過實時監(jiān)測PCR擴(kuò)增過程中的熒光信號，實現(xiàn)對靶標(biāo)核酸的定性和定量分析。擴(kuò)增曲線與Ct值用于判斷樣本中病原體的存在及濃度。
試劑組成
預(yù)混PCR Master Mix：含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及SYBR Green I染料（紅蓋裝，1 mL）。
陰性/陽性對照：陰性對照為無核酸酶水，陽性對照為副溶血性弧菌標(biāo)準(zhǔn)DNA模板。
超純水（亮黃色蓋，1 mL）。
注：具體組分可能因批次調(diào)整，以實際包裝清單為準(zhǔn)。
操作步驟
樣本處理：提取待測樣本DNA（需自備提取試劑）。
反應(yīng)體系配制：按比例混合Master Mix、引物、模板DNA及超純水。
上機檢測：按以下程序運行：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘
擴(kuò)增循環(huán)（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光）
數(shù)據(jù)分析：
定性：Ct值≤35為陽性，≥40為陰性；35<Ct<40需復(fù)測。
定量：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算模板拷貝數(shù)。
性能參數(shù)
靈敏度：可檢測低至幾百拷貝/反應(yīng)。
特異性：引物經(jīng)優(yōu)化，與近源菌株無交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：批內(nèi)/批間變異系數(shù)≤5%。
運輸與保存
運輸條件：低溫冰袋運輸。
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月。
注意事項
本試劑盒僅限科研使用。
避免反復(fù)凍融，分裝后使用。
實驗需在無菌環(huán)境下操作，防止污染。
質(zhì)量控制
每批次試劑均通過陽性對照驗證，確保擴(kuò)增效率≥90%。
陰性對照Ct值應(yīng)≥40，陽性對照Ct值≤30且呈現(xiàn)典型S型擴(kuò)增曲線。
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