擬態(tài)弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱
英文名稱
Vibrio mimicus Dye-based qPCR Kit
規(guī)格
50T
貨號
PR4523
產品用途
專用于擬態(tài)弧菌(Vibrio mimicus)的定性或定量檢測,適用于環(huán)境、食品或臨床研究樣本(非臨床診斷用途)。
試劑盒特點
高特異性:基于擬態(tài)弧菌保守序列設計引物,避免交叉反應。
靈敏度:檢測限可達幾百拷貝/反應。
便捷性:預混熒光染料(如SYBR Green),即開即用,僅需提供模板DNA。
防污染設計:一管式閉管檢測,減少氣溶膠污染風險。
檢測原理
熒光染料特性:游離狀態(tài)下吸收峰471 nm,結合DNA后吸收峰500 nm,發(fā)射峰530 nm。信號采集建議在復性或延伸階段進行。
定量分析:通過標準曲線(陽性對照log濃度 vs. Ct值)推算樣本濃度。
定性判讀:
陽性:Ct值≤35,且擴增曲線典型;
陰性:Ct值≥40;
灰區(qū):35<Ct<40需復測,復測Ct<40判為陽性。
操作步驟
反應體系配制:按說明書比例混合PCR預混液、引物、模板DNA及ddH?O。
上機參數:
預變性:95℃ 2分鐘;
循環(huán):95℃ 15秒→60℃ 30秒(采集熒光),共40循環(huán);
儀器參數需根據機型優(yōu)化。
數據分析:
定量:通過標準曲線計算樣本濃度;
定性:依據Ct值及擴增曲線判讀。
質量控制
陰性對照:Ct值應≥40;
陽性對照:Ct值≤30,且顯示典型擴增曲線。
注意事項
避免反復凍融試劑,分裝保存。
操作需在無菌環(huán)境下進行,防止污染。
本產品僅限科研使用,不可用于臨床診斷。
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