擬態(tài)弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 擬態(tài)弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Vibrio mimicus Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4523 |
產(chǎn)品用途
專用于擬態(tài)弧菌(Vibrio mimicus)的定性或定量檢測(cè),適用于環(huán)境、食品或臨床研究樣本(非臨床診斷用途)。
試劑盒特點(diǎn)
高特異性:基于擬態(tài)弧菌保守序列設(shè)計(jì)引物,避免交叉反應(yīng)。
靈敏度:檢測(cè)限可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)。
便捷性:預(yù)混熒光染料(如SYBR Green),即開即用,僅需提供模板DNA。
防污染設(shè)計(jì):一管式閉管檢測(cè),減少氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn)。
檢測(cè)原理
熒光染料特性:游離狀態(tài)下吸收峰471 nm,結(jié)合DNA后吸收峰500 nm,發(fā)射峰530 nm。信號(hào)采集建議在復(fù)性或延伸階段進(jìn)行。
定量分析:通過標(biāo)準(zhǔn)曲線(陽性對(duì)照log濃度 vs. Ct值)推算樣本濃度。
定性判讀:
陽性:Ct值≤35,且擴(kuò)增曲線典型;
陰性:Ct值≥40;
灰區(qū):35<Ct<40需復(fù)測(cè),復(fù)測(cè)Ct<40判為陽性。
操作步驟
反應(yīng)體系配制:按說明書比例混合PCR預(yù)混液、引物、模板DNA及ddH?O。
上機(jī)參數(shù):
預(yù)變性:95℃ 2分鐘;
循環(huán):95℃ 15秒→60℃ 30秒(采集熒光),共40循環(huán);
儀器參數(shù)需根據(jù)機(jī)型優(yōu)化。
數(shù)據(jù)分析:
定量:通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度;
定性:依據(jù)Ct值及擴(kuò)增曲線判讀。
質(zhì)量控制
陰性對(duì)照:Ct值應(yīng)≥40;
陽性對(duì)照:Ct值≤30,且顯示典型擴(kuò)增曲線。
注意事項(xiàng)
避免反復(fù)凍融試劑,分裝保存。
操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,防止污染。
本產(chǎn)品僅限科研使用,不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字: 擬態(tài)弧菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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