泌尿道致病性大腸桿菌(UPEC)染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 泌尿道致病性大腸桿菌(UPEC)染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Uropathogenic Escherichia coli (UPEC) Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4532 |
產(chǎn)品用途
用于泌尿道致病性大腸桿菌(UPEC)的定性及定量檢測(cè),適用于科研用途。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度與特異性:
引物針對(duì)UPEC保守序列設(shè)計(jì),可區(qū)分致病性與非致病性大腸桿菌,避免交叉反應(yīng)。
檢測(cè)限低至102拷貝/μL,線性范圍覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)(102~10?拷貝/μL)。
便捷性:
即開即用,僅需提供待測(cè)DNA模板。
含預(yù)混PCR反應(yīng)液(MagicMix 3.0),減少操作步驟。
質(zhì)控保障:
提供陽性對(duì)照(1×10?拷貝/μL),用于排除假陰性結(jié)果。
包裝組分
| 編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
| 試劑一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
| 試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃色)|
| 試劑三 | UPEC引物混合液 | 100 μL(白蓋)|
| 試劑四 | 陽性對(duì)照(DNA片段) | 50 μL(黃蓋)|
| —— | 說明書 | 1份 |
操作流程
1. 陽性對(duì)照稀釋(以102~10?拷貝/μL梯度為例):
在獨(dú)立區(qū)域用專用稀釋液進(jìn)行10倍梯度稀釋,避免污染。
標(biāo)記離心管(7~2號(hào)),依次加入45 μL稀釋液及5 μL上一步稀釋產(chǎn)物,渦旋混勻。
2. PCR反應(yīng)體系配制(20 μL/反應(yīng)):
| 組分 | 體積 |
| PCR MagicMix 3.0 | 10 μL |
| 引物混合液 | 2 μL |
| 模板DNA/陽性對(duì)照 | 2 μL |
| 超純水 | 6 μL |
3. 熒光定量PCR程序:
預(yù)變性:95℃ 5 min;
循環(huán)階段(40 cycles):95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec(采集熒光信號(hào));
熔解曲線分析:60℃~95℃,升溫速率0.3℃/sec。
注意事項(xiàng)
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,有效期12個(gè)月。
生物安全:陽性對(duì)照為滅活DNA片段,無需活菌操作。
適用范圍:僅限科研,不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字: 泌尿道致病性大腸桿菌(UPEC);染料法熒光定量;RT-PCR試劑盒;
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