犬瘟熱病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 犬瘟熱病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Canine Distemper Virus Dye-based qRT-PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4549 |
產(chǎn)品用途
本試劑盒基于染料法熒光定量RT-PCR技術(shù),用于定性或定量檢測犬瘟熱病毒(CDV)RNA。適用于犬的分泌物(鼻汁、唾液、淚液)、排泄物、血液及組織樣本中的CDV核酸檢測,為臨床診斷和流行病學調(diào)查提供依據(jù)。
檢測原理
采用一步法熒光定量RT-PCR技術(shù),通過特異性引物擴增CDV RNA保守區(qū)域,結(jié)合熒光染料(如SYBR Green)實時監(jiān)測擴增產(chǎn)物。熒光信號強度與病毒RNA含量成正比,通過標準曲線可實現(xiàn)定量分析。
產(chǎn)品特點
高靈敏度:優(yōu)化引物設(shè)計,檢測限低至10^2 copies/μL。
高特異性:引物針對CDV高度保守區(qū),避免與其他病原體交叉反應。
即開即用:預混反應體系(含逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶、dNTPs等),僅需加入模板RNA。
雙重功能:支持定性與定量檢測,定量線性范圍達5個數(shù)量級(10^2–10^7 copies/μL)。
質(zhì)控保障:含陽性對照(CDV RNA標準品),便于排除假陰性。
儲存與有效期
儲存條件:-20℃±5℃避光保存,避免反復凍融。
有效期:12個月(以包裝標注為準)。
操作流程
樣本處理:按規(guī)范提取樣本RNA。
反應配制:將模板RNA、預混液、引物加入PCR管。
擴增檢測:按以下程序運行熒光定量PCR儀:
逆轉(zhuǎn)錄:50℃ 10分鐘
預變性:95℃ 3分鐘
循環(huán)階段(40 cycles):95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(采集熒光)
結(jié)果分析:通過閾值循環(huán)數(shù)(Ct值)判定陽性或定量計算。
注意事項
實驗需在無菌環(huán)境下操作,避免RNA降解。
試劑解凍后需徹底混勻,分裝使用以減少凍融次數(shù)。
陽性對照與待測樣本需分區(qū)域操作,防止污染。
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