戈氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 戈氏放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Actinomyces gerencseriae Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4559 |
產品特點
即開即用：用戶僅需提供戈氏放線菌DNA模板。
高特異性：基于戈氏放線菌保守序列設計的引物，無交叉反應。
高靈敏度：檢測下限可達數(shù)百拷貝/反應。
閉管檢測：一管式熒光定量PCR，避免氣溶膠污染。
規(guī)格及組分
| 成分 | 規(guī)格/包裝 | 保存條件 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | -20℃避光 |
| 熒光PCR模板稀釋液 | 1 mL（黃蓋） | -20℃ |
| 引物混合物 | 100 μL（白蓋） | -20℃避光 |
| 陽性對照（1×10?拷貝/μL） | 50 μL（紅蓋） | -20℃ |
| 使用手冊 | 1份 | 常溫 |
自備試劑
DNA模板、10×ROX校正染料（根據機型需求選擇）。
運輸與保存
運輸：低溫干冰運輸。
保存：-20℃避光保存，有效期12個月。
使用方法
陽性對照稀釋（102~10?拷貝/μL梯度制備）
注意事項：操作需在獨立潔凈區(qū)域進行，避免污染試劑盒其他組分。
標記離心管：編號為2~7號，每管加入45 μL模板稀釋液。
梯度稀釋：
7號管：加入5 μL陽性對照（1×10?拷貝/μL），震蕩混勻，得1×10?拷貝/μL。
依次轉移5 μL至下一管，連續(xù)稀釋至2號管（1×102拷貝/μL）。
保存：稀釋后標準品置于冰上備用。
PCR反應體系
每20 μL反應體系建議配比：
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合物：2 μL
DNA模板：2 μL
ROX（可選）：0.4 μL
超純水：補至20 μL
擴增程序
（需根據機型優(yōu)化，以下為通用參考）：
預變性：95℃ 3分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）
注意事項
陽性對照為DNA片段，非活體樣本。
實驗廢棄物需按生物安全規(guī)范處理。
避免反復凍融試劑，分裝后使用。
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關鍵字： 戈氏放線菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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