皺褶青霉染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 皺褶青霉染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Penicillium rugulosum Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4564 |
檢驗(yàn)原理
本試劑盒基于SYBR Green染料法熒光定量PCR技術(shù)，通過檢測(cè)雙鏈DNA結(jié)合染料的熒光信號(hào)實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)基因的定量分析。特點(diǎn)包括：
高靈敏度：檢測(cè)下限達(dá)100拷貝/反應(yīng)。
高特異性：引物針對(duì)皺褶青霉（Penicillium rugulosum）高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，避免與其他生物DNA交叉反應(yīng)。
多功能性：支持定性和定量檢測(cè)，定量線性范圍覆蓋至少5個(gè)數(shù)量級(jí)。
即用型設(shè)計(jì)：用戶僅需提供樣品DNA模板，試劑盒包含預(yù)混MasterMix，簡(jiǎn)化操作流程。
試劑組成
2×SYBR qPCR MasterMix：0.5 mL ×1管（含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及SYBR Green染料）。
熒光PCR專用模板稀釋液：1 mL ×1管（用于標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋）。
超純水：1 mL ×1管（陰性對(duì)照或稀釋用途）。
陽性對(duì)照（部分版本提供）：含靶標(biāo)基因片段，用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性。
操作流程
模板制備：提取待測(cè)樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。
反應(yīng)體系配制：按20μL體系混合模板、引物、MasterMix及超純水。
PCR程序設(shè)置：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘（復(fù)雜樣本需延長(zhǎng)至10分鐘）。
循環(huán)階段：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循環(huán)），熒光信號(hào)采集于延伸步驟完成時(shí)。
數(shù)據(jù)分析：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或Ct值比較實(shí)現(xiàn)定量分析。
注意事項(xiàng)
避免污染：實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作，使用無核酸酶耗材。
引物驗(yàn)證：若需自行設(shè)計(jì)引物，需通過BLAST驗(yàn)證特異性。
保存與運(yùn)輸：反復(fù)凍融≤3次，長(zhǎng)期儲(chǔ)存建議分裝。
常見問題解決
無擴(kuò)增信號(hào)：檢查模板完整性或稀釋陽性對(duì)照驗(yàn)證試劑活性。
非特異性擴(kuò)增：優(yōu)化退火溫度或重新設(shè)計(jì)引物。
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關(guān)鍵字： 皺褶青霉;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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