檢驗(yàn)原理
本試劑盒基于SYBR Green I染料法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對(duì)毛樣枝孢霉基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物，通過(guò)熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)核酸擴(kuò)增過(guò)程，實(shí)現(xiàn)定性及定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 毛樣枝孢霉染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Cladosporium trichoides Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR4452 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高特異性：引物針對(duì)毛樣枝孢霉保守序列設(shè)計(jì)，與相近物種無(wú)交叉反應(yīng)。
高靈敏度：檢測(cè)限可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)（或0.1 pg RNA/DNA模板）。
便捷性：預(yù)混式試劑，即開即用，僅需提供待測(cè)核酸模板。
防污染設(shè)計(jì)：一管式閉管檢測(cè)，避免氣溶膠污染。
適用范圍：適用于科研用途（不可用于臨床診斷）。
試劑組成
| 組分名稱 | 規(guī)格/包裝 |
| 2×qPCR預(yù)混液（含SYBR Green） | 500 μL（棕色管） |
| 毛樣枝孢霉特異性引物混合物 | 100 μL（白蓋管） |
| 陽(yáng)性對(duì)照（1×10^8拷貝/μL） | 50 μL（紅蓋管） |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL（黃蓋管） |
| 使用說(shuō)明書 | 1份 |
自備試劑
DNA/RNA模板
10×ROX校正染料（根據(jù)儀器型號(hào)選配）
運(yùn)輸與保存
低溫運(yùn)輸（冰袋或干冰），-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
使用方法
1. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（以10^2–10^7拷貝/μL梯度為例）
標(biāo)記6管稀釋液，依次加入45 μL專用稀釋液，梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照（每次換槍頭）。
稀釋后置于冰上備用，避免反復(fù)凍融。
2. 反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| 2×qPCR預(yù)混液 | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| 模板DNA/稀釋陽(yáng)性對(duì)照 | 2 |
| RNase-free水 | 補(bǔ)足至20 |
3. 擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光）
熔解曲線分析：60–95℃（儀器默認(rèn)設(shè)置）
注意事項(xiàng)
操作需在獨(dú)立潔凈區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
陽(yáng)性對(duì)照需與待測(cè)樣本分區(qū)域操作。
熔解曲線需呈現(xiàn)單峰，否則可能存在非特異性擴(kuò)增。
質(zhì)量控制
陰性對(duì)照：無(wú)擴(kuò)增曲線（Ct值≥40或無(wú)信號(hào)）。
陽(yáng)性對(duì)照：Ct值≤35，且熔解峰單一。
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關(guān)鍵字： 毛樣枝孢霉;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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