流感嗜血桿菌B型染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 流感嗜血桿菌B型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Haemophilus influenzae type B Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4601 |
產(chǎn)品用途
專用于科研實驗中流感嗜血桿菌B型核酸的定性或定量檢測，不可用于臨床診斷。
檢測原理
基于染料法熒光定量PCR技術(shù)，通過特異性引物擴增靶序列，結(jié)合熒光信號實時監(jiān)測擴增產(chǎn)物。
靈敏度：可檢測低至幾百拷貝/反應(yīng)的病毒核酸。
特異性：針對流感嗜血桿菌B型保守序列設(shè)計引物，與其他常見病原體無交叉反應(yīng)。
規(guī)格與成分
規(guī)格：50次/盒（20 μL反應(yīng)體系）。
主要成分：
試劑一：2×qPCR MagicMix（預(yù)混酶、dNTPs、緩沖液等），500 μL（棕色管）。
試劑二：熒光PCR專用模板稀釋液，1 mL（黃蓋）。
試劑三：流感嗜血桿菌B型特異性引物混合液，100 μL（白蓋）。
保存與運輸
保存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
有效期：6個月至1年（不同略有差異）。
運輸：低溫（冰袋或干冰）運輸。
操作步驟
樣本處理：提取待測樣本RNA/DNA，使用試劑二稀釋模板。
反應(yīng)體系配制（以20 μL為例）：
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合液：2 μL
模板DNA：2 μL
無核酸酶水：補足至20 μL
PCR程序設(shè)置：
預(yù)變性：94℃ 5 min（1循環(huán)）
擴增循環(huán)（30-40次）：
變性：94℃ 10 sec
退火：50-65℃（依引物Tm值優(yōu)化） 20 sec
延伸：72℃ 30 sec/kb（片段≤1 kb時建議30 sec）
終延伸：72℃ 5 min（1循環(huán)）
注意事項
退火溫度優(yōu)化：建議低于引物理論Tm值2-5℃，通過梯度PCR確定最佳條件。
污染控制：
分裝試劑，避免反復(fù)凍融。
實驗分區(qū)操作（樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)）。
異常結(jié)果處理：
無擴增信號：檢查試劑活性、引物特異性或重新優(yōu)化反應(yīng)條件。
非特異性條帶：調(diào)整退火溫度或更換引物。
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關(guān)鍵字： 流感嗜血桿菌B型;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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