禽嗜血桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 禽嗜血桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Haemophilus gallinarum Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4603 |
產品概述
本試劑盒采用染料法熒光定量PCR技術,專為禽嗜血桿菌(Avibacterium paragallinarum)核酸檢測設計,適用于臨床樣本、環(huán)境樣本或培養(yǎng)物的病原學快速檢測。試劑盒包含優(yōu)化反應體系,可實現(xiàn)對目標病原體的高特異性、高靈敏度檢測,支持定性和定量分析。
試劑盒組成
反應體系:預混凍干粉末(含引物、探針、dNTPs、酶等),復溶后單次反應體積≥25μL。
陽性質控品:含禽嗜血桿菌特異性靶序列,用于實驗有效性驗證。
陰性質控品:無核酸酶水或無關序列,用于排除污染。
復溶劑:用于凍干粉末的溶解。
說明書(原件或彩頁)。
保存條件與有效期
保存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
有效期:12個月(自生產日期起)。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀,包括但不限于:
ABI 7500
安捷倫MX3000P/3005P
Bio-Rad系列
Eppendorf系列
檢測性能
特異性:針對禽嗜血桿菌保守序列設計引物,與副豬嗜血桿菌(HPS)、禽源其他病原體無交叉反應。
靈敏度:可檢測低至幾百拷貝/反應的靶標核酸。
反應程序:
95℃預變性2分鐘;
95℃變性10秒→60℃延伸35秒,共45個循環(huán)(FAM通道采集熒光信號)。
操作步驟
樣本處理:按標準方法提取待測樣本DNA。
試劑復溶:將凍干粉末與復溶劑混合,充分溶解后分裝至反應管。
加樣:每反應管加入模板DNA 2-5μL,陰性/陽性質控品各設1孔。
上機檢測:按上述程序運行,儀器自動生成擴增曲線和Ct值。
結果判讀
定性檢測:
陽性:Ct值≤35,且擴增曲線呈典型S型;
陰性:Ct值≥40或無擴增;
可疑(35<Ct<40):需重復檢測,重復結果Ct<40判為陽性。
定量檢測:以陽性質控品標準曲線計算樣本拷貝數(shù)。
注意事項
實驗需在無菌環(huán)境下操作,避免氣溶膠污染。
試劑開封后建議分裝保存,減少凍融次數(shù)。
不同儀器需根據(jù)說明書調整ROX參比染料的使用。
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關鍵字: 禽嗜血桿菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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