預(yù)期用途
本試劑盒用于禽副粘病毒4型（APMV-4）RNA的體外定性檢測(cè)，適用于動(dòng)物組織、拭子樣本等臨床或科研樣本的病原學(xué)診斷。其檢測(cè)原理基于染料法熒光定量RT-PCR技術(shù)，通過(guò)特異性引物擴(kuò)增病毒保守序列，結(jié)合熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過(guò)程，實(shí)現(xiàn)高靈敏度、高特異性的檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 禽副粘病毒4型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Avian Paramyxovirus 4 Dye-based qRT-PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類(lèi) | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類(lèi)型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR4470 |
試劑盒組成
（50T/盒規(guī)格）
2×qPCR Master Mix：含DNA聚合酶、dNTPs及優(yōu)化緩沖體系（500μL×1管，棕色管）。
熒光RT-PCR專(zhuān)用模板稀釋液：用于樣本RNA的稀釋與保存（1mL×1管，黃蓋）。
APMV-4特異性引物混合物：針對(duì)病毒保守區(qū)域設(shè)計(jì)（100μL×1管，白蓋）。
APMV-4陽(yáng)性對(duì)照（1×10^8拷貝/μL）：用于質(zhì)控反應(yīng)體系（50μL×1管，紅蓋）。
陰性對(duì)照：無(wú)核酸酶水或PBS緩沖液（250μL×1管）。
使用手冊(cè)：含操作流程、數(shù)據(jù)分析方法及注意事項(xiàng)。
儲(chǔ)存條件與有效期
保存于-20℃±5℃，避光防凍融（反復(fù)凍融≤5次）。
有效期12個(gè)月。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀，包括但不限于：
ABI 7500
安捷倫 MX3000P/3005P
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler
Eppendorf RealPlex
樣本采集與處理
組織樣本：取腦、肺、脾、腎等組織，勻漿后離心取上清。
拭子樣本：采集口咽或泄殖腔拭子，置于含PBS（含抗生素）的保存液中。
RNA提?。航ㄗh使用柱式或磁珠法RNA提取試劑盒，避免降解。
檢測(cè)流程
反應(yīng)體系配制：按20μL/反應(yīng)混合Master Mix、引物、模板RNA及對(duì)照品。
PCR程序設(shè)置：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘
預(yù)變性：95℃ 3分鐘
擴(kuò)增循環(huán)（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）
數(shù)據(jù)分析：以Ct值判定結(jié)果，陰性樣本無(wú)擴(kuò)增曲線(xiàn)，陽(yáng)性對(duì)照Ct值≤35。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，避免交叉污染。
不同批號(hào)組分不可混用。
性能參數(shù)
靈敏度：最低檢測(cè)限為100拷貝/反應(yīng)。
特異性：與禽副粘病毒其他亞型（如APMV-1、APMV-2）無(wú)交叉反應(yīng)。
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關(guān)鍵字： 禽副粘病毒4型;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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