預(yù)期用途
本試劑盒適用于臨床咽拭子、肛拭子、血清、組織滲出液等樣本中甲型流感病毒（包括H1、H3等亞型）RNA的定性檢測。檢測結(jié)果需結(jié)合臨床癥狀及其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)綜合判斷，不可作為唯一診斷依據(jù)。
產(chǎn)品名稱 | 甲型流感（禽流感）病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Avian Influenza Virus Universal Dye-based qRT-PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4498 |
檢測原理
采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)，通過特異性引物和熒光染料（如SYBR Green）靶向擴(kuò)增甲型流感病毒保守基因片段（如M基因或NP基因）。擴(kuò)增過程中，熒光信號與產(chǎn)物量成正比，通過實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光強(qiáng)度實(shí)現(xiàn)定量分析。
主要組成
RT-PCR反應(yīng)液：含逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶、dNTPs及緩沖成分。
甲型流感病毒通用引物混合液：針對病毒保守區(qū)域設(shè)計(jì)。
陽性對照：滅活甲型流感病毒RNA。
陰性對照：無核酸酶水。
內(nèi)標(biāo)對照（可選）：用于監(jiān)測提取及擴(kuò)增效率。
操作步驟
樣本處理：按規(guī)范提取樣本RNA，建議使用配套核酸提取試劑。
反應(yīng)體系配制：將反應(yīng)液、引物混合液與模板RNA混合，離心后分裝至PCR管。
擴(kuò)增程序：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘
預(yù)變性：95℃ 3分鐘
擴(kuò)增循環(huán)（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35，且擴(kuò)增曲線呈典型S型。
陰性：無擴(kuò)增曲線或Ct值>40。
可疑：Ct值35-40，建議復(fù)測或結(jié)合臨床評估。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)需在符合生物安全等級的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。
避免反復(fù)凍融試劑，分裝后-20℃保存。
批號不同的組分不可混用。
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