采用雙抗體夾心法。將抗大鼠ANXA5抗體包被在酶標板上，樣本和標準品中的ANXA5與包被抗體結合，接著加入生物素化的抗大鼠ANXA5抗體，形成免疫復合物，再加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素，與生物素結合，加入TMB底物顯色，根據OD值與標準曲線，確定樣本中ANXA5的濃度。
產品名稱 | 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANXA5)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名稱 | RatANXA5 elisa kit | 貨號 | PR10550 |
檢測范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數據：
以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗數據建立標準曲線。
| 校準品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夾心法標曲：
核心參數：
原理：雙抗體夾心法 ELISA
種屬：大鼠特異性
樣本：血清、血漿、細胞上清、組織勻漿
時長：3-4h
保存：2-8℃避光冷藏
特異性：專一結合大鼠 ANXA5
板內 CV：＜8%
操作步驟:
試劑盒平衡：實驗前20分鐘將試劑盒從冰箱取出，平衡至室溫（20-25℃）
板條準備：從鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條密封放回2-8℃保存
加樣
標準品孔：加入不同濃度標準品50μL（濃度通常為10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
樣本孔：先加樣本稀釋液40μL，再加待測樣本10μL（最終稀釋5倍）
空白孔：不加任何液體
加酶標抗體：除空白孔外，每孔加入HRP標記的檢測抗體100μL
溫育：封板膜封板后，37℃溫育60分鐘
洗滌
棄去孔內液體，吸水紙上拍干
每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1分鐘后棄去，重復洗板5次
最后一次洗滌后徹底拍干孔內液體
顯色：每孔加入顯色劑A、B各50μL，輕輕混勻，37℃避光顯色15分鐘
終止反應：每孔加入終止液50μL，藍色立即轉為黃色
讀數：15分鐘內用酶標儀在450nm波長處測定各孔OD值
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關鍵字： 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ;ANXA5;elisa試劑盒;
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