本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔預(yù)先包被大鼠ANX-Ⅴ特異性抗體，加入待測(cè)大鼠樣本和標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的ANX-Ⅴ抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標(biāo)記二抗形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物，顯色終止后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)ANX-Ⅴ的定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒
英文名稱：ANX-Ⅴ ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1231
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.06ng/mL
檢測(cè)范圍：0.15ng/mL - 6ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)125min
保存條件：2-8℃避光保存，試劑密封防潮，禁止冷凍
有效期：未開(kāi)封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng)：TMB穩(wěn)定顯色體系，適配凋亡相關(guān)蛋白檢測(cè)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm、630nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：梯度標(biāo)準(zhǔn)品OD值擬合曲線，定量檢測(cè)ANX-Ⅴ含量
特異性：特異性識(shí)別大鼠ANX-Ⅴ，與其他膜聯(lián)蛋白家族成員交叉反應(yīng)率極低
重復(fù)性：板內(nèi)CV＜8%，板間CV＜10%
注意事項(xiàng)：凋亡樣本及時(shí)處理，避免蛋白降解；無(wú)鈣鎂污染，保證蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；洗滌充分，降低背景干擾
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
預(yù)包被板每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 48μL，細(xì)胞凋亡上清待測(cè)樣本 48μL，設(shè)置空白孔。
加入 HRP 酶標(biāo)記特異性抗體 101μL，覆膜封板，37℃孵育 54min。
棄液后洗滌液注滿微孔靜置 28s，拍干，洗板 4 次。
避光加入顯色 AB 液各 50μL，輕微搖晃板體，顯色 17min。
終止液 50μL 每孔加入，終止顯色并混勻孔內(nèi)液體。
擦拭板底污漬，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度。
代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 ANX-Ⅴ 含量，反映細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白水平。
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關(guān)鍵字： 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ;ANX-Ⅴ;ELISA試劑盒;
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