肌肉型6磷酸果糖激酶/磷酸果糖激酶1抗體
原理特點(diǎn)
該抗體靶向肌肉型PFK1蛋白，原理是特異性結(jié)合糖酵解關(guān)鍵限速酶肌肉型PFK1抗原位點(diǎn)，調(diào)控肌肉細(xì)胞糖酵解能量代謝。產(chǎn)品特點(diǎn)為亞型靶向精準(zhǔn)，區(qū)分肌肉、肝臟、血小板型PFK1，特異性高，可檢測(cè)肌肉糖代謝水平，適配肌肉能量代謝、代謝紊亂、運(yùn)動(dòng)生理研究。
英文名稱:PFKM/PFK1 Rabbit pAb
中文名稱:肌肉型6磷酸果糖激酶/磷酸果糖激酶1抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Fructose 6 Phosphate Kinase; 6 phosphofructokinase Muscle Type; GSD7; PFKA; PFK-A; PFKX; phosphofructo 1 Kinase Isozyme A; phosphofructo-1-kinase isozyme A; phosphofructokinase 1; phosphofructokinase M; phosphofructokinase-M; phosphofructokinase, muscle; phosphofructokinase, muscle type; phosphofructokinase, polypeptide X; phosphohexokinase; PFKAM_HUMAN; 6-phosphofructokinase, muscle type; PFK1; PFK-1; ATP-PFK; PPP1R122.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human 6 Phosphofructokinase Muscle Type
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：86 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
糖酵解調(diào)控：肌肉型6磷酸果糖激酶（PFKM）是肌肉細(xì)胞中的糖酵解關(guān)鍵酶，催化果糖-6-磷酸生成果糖-1,6-二磷酸，調(diào)控糖酵解速率，為肌肉收縮提供能量，維持肌肉能量代謝穩(wěn)態(tài)，確保運(yùn)動(dòng)時(shí)的快速能量供應(yīng)。
糖原累積病關(guān)聯(lián)：PFKM基因突變可導(dǎo)致糖原累積?、餍停═arui?。?，患者肌肉糖酵解功能障礙，運(yùn)動(dòng)時(shí)肌肉無法有效利用葡萄糖，導(dǎo)致肌肉疼痛、痙攣和疲勞；其抗體可用于檢測(cè)PFKM表達(dá)水平和活性，輔助診斷糖原累積?、餍秃驮u(píng)估疾病進(jìn)展。
研究價(jià)值：PFKM抗體可用于研究肌肉糖酵解機(jī)制、糖原累積病發(fā)病機(jī)制；開發(fā)治療糖???
樣本處理與實(shí)驗(yàn)操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細(xì)胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時(shí)
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時(shí)），或室溫孵育1-2小時(shí)；孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時(shí)
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時(shí)置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標(biāo)記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時(shí)間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細(xì)胞免疫熒光）
樣本制備
細(xì)胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時(shí)
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標(biāo)記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時(shí)
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時(shí)，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標(biāo)二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時(shí)
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
NALP12抗體 | Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG H&L | SLC39A10 Antibody Blocking Peptide |
早老素蛋白-1抗體 | Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L | Smad3 Antibody Blocking Peptide |
干擾腎細(xì)胞ai蛋白2抗體 | FITC標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 | NELL1 Antibody Blocking Peptide |
17β羥基類固醇脫氫酶12/17β-HSD12抗體 | Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgG H&L | IFT122 Antibody Blocking Peptide |
潛在型TGF-β結(jié)合蛋白2抗體 | 羅丹明標(biāo)記的兔抗豬IgG H&L | CCDC138 Antibody Blocking Peptide |
白細(xì)胞介素27受體抗體 | 辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG H&L | phospho-LATS2 (Ser83) Antibody Blocking Peptide |
鉻細(xì)胞liu患者抑ai基因SDHB抗體 | 肌肉型6磷酸果糖激酶/磷酸果糖激酶1抗體FITC標(biāo)記的驢抗兔IgG H&L | PLEC Antibody Blocking Peptide |
肌球蛋白重鏈抗體 | Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM | CNTFR Antibody Blocking Peptide |
退行性精母細(xì)胞同源物1抗體 | Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgG H&L | KLRA1 Antibody Blocking Peptide |
關(guān)鍵字： 肌肉型6磷酸果糖激酶/磷酸果糖激酶1抗體;86 kDa;Rabbit;
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