產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化B-Raf抗體 | 貨號 | YS-K7113 |
英文名稱 | phospho-BRAF (Ser729) Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:B Raf(phospho S729); p-B Raf(phospho S729); BRAF_HUMAN; Serine/threonine-protein kinase B-raf; EC:2.7.11.1; BRAF1; RAFB1; Proto-oncogene B-Raf; p94; v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1; B-Raf proto-oncogene, serine/threonine kinase; NS7; B-raf; B-RAF1; BRAF-1; 94 kDa B raf protein;
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human BRAF around the phosphorylation site of Ser729
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：94 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點
磷酸化B-Raf是Raf/MAPK通路的活化關(guān)鍵蛋白，接收上游Ras信號后磷酸化活化，啟動下游ERK級聯(lián)反應(yīng)，調(diào)控細(xì)胞增殖、分化與腫瘤惡變。該抗體特異性識別B-Raf磷酸化活化位點，精準(zhǔn)檢測通路活化水平；同時可結(jié)合活化蛋白阻斷其激酶活性，抑制下游增殖信號傳導(dǎo)，阻斷腫瘤細(xì)胞異常增殖。
靶點背景
靶點背景：B-Raf 是 MAPK 通路上游激酶，Ser338 等位點磷酸化代表激活，BRAF 突變是黑色素瘤、肺癌驅(qū)動突變。
作用原理：免疫原為磷酸化位點特異性多肽，僅結(jié)合活化磷酸化 B-Raf，無總 B-Raf 交叉識別。
產(chǎn)品特點：WB、IHC 精準(zhǔn)檢出通路活化水平；用于 BRAF 靶向藥藥效、實體瘤突變型通路活性檢測。
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實驗操作過程注意事項
抗體稀釋
使用專用抗體稀釋液或含BSA的緩沖液稀釋抗體，避免用純水稀釋（純水中無鹽分會導(dǎo)致抗體變性）；
嚴(yán)格按照說明書的建議稀釋比例進(jìn)行稀釋，若說明書未提供，可通過預(yù)實驗確定最佳稀釋比例（通常1:500-1:10000）；
稀釋后的抗體需一次性用完，未用完的部分不可再次凍存。
抗體孵育
一抗孵育：通常4℃孵育過夜，可減少非特異性結(jié)合，避免室溫孵育時間過長導(dǎo)致抗體變性；
二抗孵育：室溫孵育1-2小時，孵育期間需避光（熒光二抗）；
孵育時需保證抗體均勻覆蓋樣本表面，避免產(chǎn)生氣泡；
實驗過程中使用封閉液（如5%BSA或脫脂牛奶）封閉非特異性結(jié)合位點，減少背景信號。
洗滌步驟
每步孵育后，需用PBST或TBST洗滌3-5次，每次5分鐘，徹底去除未結(jié)合的抗體；
洗滌時需輕輕晃動培養(yǎng)板或載玻片，避免用力過猛導(dǎo)致樣本脫落；
洗滌液需新鮮配制，避免使用過期或變質(zhì)的洗滌液。
關(guān)鍵字： 磷酸化B-Raf抗體;94 kDa;Rabbit;
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