產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化B-Raf抗體 | 貨號(hào) | YS-K7113 |
英文名稱 | phospho-BRAF (Ser729) Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:B Raf(phospho S729); p-B Raf(phospho S729); BRAF_HUMAN; Serine/threonine-protein kinase B-raf; EC:2.7.11.1; BRAF1; RAFB1; Proto-oncogene B-Raf; p94; v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1; B-Raf proto-oncogene, serine/threonine kinase; NS7; B-raf; B-RAF1; BRAF-1; 94 kDa B raf protein;
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來(lái)源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human BRAF around the phosphorylation site of Ser729
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：94 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
磷酸化B-Raf是Raf/MAPK通路的活化關(guān)鍵蛋白，接收上游Ras信號(hào)后磷酸化活化，啟動(dòng)下游ERK級(jí)聯(lián)反應(yīng)，調(diào)控細(xì)胞增殖、分化與腫瘤惡變。該抗體特異性識(shí)別B-Raf磷酸化活化位點(diǎn)，精準(zhǔn)檢測(cè)通路活化水平；同時(shí)可結(jié)合活化蛋白阻斷其激酶活性，抑制下游增殖信號(hào)傳導(dǎo)，阻斷腫瘤細(xì)胞異常增殖。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：B-Raf 是 MAPK 通路上游激酶，Ser338 等位點(diǎn)磷酸化代表激活，BRAF 突變是黑色素瘤、肺癌驅(qū)動(dòng)突變。
作用原理：免疫原為磷酸化位點(diǎn)特異性多肽，僅結(jié)合活化磷酸化 B-Raf，無(wú)總 B-Raf 交叉識(shí)別。
產(chǎn)品特點(diǎn)：WB、IHC 精準(zhǔn)檢出通路活化水平；用于 BRAF 靶向藥藥效、實(shí)體瘤突變型通路活性檢測(cè)。
公司正在出售的產(chǎn)品
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實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程注意事項(xiàng)
抗體稀釋
使用專用抗體稀釋液或含BSA的緩沖液稀釋抗體，避免用純水稀釋（純水中無(wú)鹽分會(huì)導(dǎo)致抗體變性）；
嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的建議稀釋比例進(jìn)行稀釋，若說(shuō)明書(shū)未提供，可通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳稀釋比例（通常1:500-1:10000）；
稀釋后的抗體需一次性用完，未用完的部分不可再次凍存。
抗體孵育
一抗孵育：通常4℃孵育過(guò)夜，可減少非特異性結(jié)合，避免室溫孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致抗體變性；
二抗孵育：室溫孵育1-2小時(shí)，孵育期間需避光（熒光二抗）；
孵育時(shí)需保證抗體均勻覆蓋樣本表面，避免產(chǎn)生氣泡；
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用封閉液（如5%BSA或脫脂牛奶）封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，減少背景信號(hào)。
洗滌步驟
每步孵育后，需用PBST或TBST洗滌3-5次，每次5分鐘，徹底去除未結(jié)合的抗體；
洗滌時(shí)需輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板或載玻片，避免用力過(guò)猛導(dǎo)致樣本脫落；
洗滌液需新鮮配制，避免使用過(guò)期或變質(zhì)的洗滌液。
關(guān)鍵字： 磷酸化B-Raf抗體;94 kDa;Rabbit;
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