產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 磷脂酰肌醇激酶單克隆抗體 | 貨號 | YS-K7228 |
英文名稱 | PIK3R1 Mouse mAb | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:P85A_HUMAN; Phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit alpha; GRB1; PI3-kinase regulatory subunit alpha; PI3K regulatory subunit alpha; PtdIns-3-kinase regulatory subunit alpha; Phosphatidylinositol 3-kinase 85 kDa regulatory subunit alpha(PI3-kinase subunit p85-alpha; PtdIns-3-kinase regulatory subunit p85-alpha); PI 3-kinase p85α; PI 3-kinase p85 α; PI 3-kinase p85-α; SH3_PI3K_p85alpha; PI3-kinase p85 subunit alpha; phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 1; p85; AGM7; IMD36; p85-ALPHA; PI 3 Kinase p85 alpha;
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Mouse
免疫原:Recombinant mouse PI3K p85 Protein
亞型:IgG
性狀:Size : 50ul/100ul/200ul <br/> Liquid<br/><br/>Size : 200ug (PBS only) <br/> Lyophilized<br/> Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.
純化方法:affinity purified by Protein G
克隆類型:Monoclonal
克隆號：5C11
理論分子量：80 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：Size : 50ul/100ul/200ul<br/>0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)<br/>0.01M PBS
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點
該單克隆抗體高特異性識別PI3K激酶保守抗原表位，特異性強、無內(nèi)源交叉干擾，可精準靶向PI3K功能蛋白。其可高靈敏度檢測PI3K表達與活化水平，精準量化通路活性；同時可強效封閉激酶活性位點，高效抑制PI3K下游信號傳導(dǎo)，適配高精度定量實驗、靶向干預(yù)實驗與腫瘤通路機制研究。
靶點背景
靶點背景：識別 PI3K 家族保守催化結(jié)構(gòu)域，覆蓋 α/β/δ/γ 主流 I 類催化亞基，快速檢測整體 PI3K 總表達量。
作用機制：雜交瘤制備單克隆，結(jié)合家族保守抗原表位，廣譜識別全部 I 類 PI3K 催化蛋白。
產(chǎn)品特點：初篩整體 PI3K 通路水平，無法分亞型；適合高通量樣本通路活性初篩，后續(xù)搭配亞型抗體精細區(qū)分。
公司正在出售的產(chǎn)品
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核心實驗操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時，孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標記二抗（如FITC標記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標二抗（1:5000），37℃孵育1小時；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標儀450nm波長讀取OD值。
關(guān)鍵字： 磷脂酰肌醇激酶單克隆抗體;80 kDa;Mouse;
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