磷酸化叉頭蛋白家族1抗體
原理特點
該抗體廣譜識別FoxO1磷酸化活化形式,檢測FoxO1整體活化水平,FoxO1主導機體糖脂代謝、細胞凋亡、衰老調控。可通過結合活化蛋白阻斷其轉錄功能,干擾代謝穩(wěn)態(tài)與細胞衰老進程。
英文名稱:phospho-FoxO1 (Ser329) Rabbit pAb
中文名稱:磷酸化叉頭蛋白家族1抗體

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Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:FOXO1A(phospho S329); p-FOXO1A(S329); FKHR(phospho-Ser319); Forkhead box protein O1; Afxh; AI876417; FKHR; Fkhr1; Foxo1a; Forkhead; FKH 1; FKH1; FKH1; FKHR; FKHR; Forkhead(Drosophila) homolog 1(rhabdomyosarcoma); Forkhead(Drosophila) homolog 1(rhabdomyosarcoma); Forkhead box O1; Forkhead box protein O1; Forkhead box protein O1A; Forkhead in rhabdomyosarcoma; Forkhead, Drosophila, homolog of, in rhabdomyosarcoma; FOXO1; FOXO1; FOXO1_HUMAN; FOXO1A.
交叉反應:Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human FoxO1 around the phosphorylation site of Ser329
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量:72 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
靶點背景:FOXO1 多個絲氨酸位點均可被 AKT、SGK 激酶磷酸化,整體磷酸化水平決定轉錄活性高低,參與代謝、生殖、腫瘤調控。
抗體原理:選用 FOXO1 多個保守 AKT 磷酸化區(qū)域混合肽免疫,識別多個活化抑制位點修飾的 FOXO1 總磷酸化水平。
產品特點:快速評估 FOXO1 整體失活程度,適合批量樣本初篩;無法拆分單個位點修飾差異,精細機制需位點特異性抗體配合。
實驗優(yōu)化與注意事項
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法:設置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000)和二抗?jié)舛忍荻?,選擇信噪比最高的組合
預實驗:首次使用建議進行濃度梯度預實驗,確定最佳工作濃度
樣本處理要點
細胞樣本:貼壁細胞用細胞刮收集,懸浮細胞離心收集,盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本:新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存,避免反復凍融
磷酸化蛋白:全程冰上操作,加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結果判斷與分析
WB:觀察是否出現特異性條帶,陰性對照應無條帶或明顯弱于陽性對照
IHC:陽性信號應定位于目標蛋白的正常亞細胞結構(如細胞核、細胞膜)
IF:觀察熒光信號是否與目標蛋白亞細胞定位一致,DAPI染色定位細胞核
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關鍵字: 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體;72 kDa;Rabbit;
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