產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體 | 貨號(hào) | YS-K7265 |
英文名稱 | Endostatin Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Collagen XV alpha 1; alpha 1 collagen type 18(XVIII)(COL18A1); alpha 1 type XVIII collagen; COL18A1; Collagen alpha 1(XVIII) chain; Collagen type XVIII alpha 1; FLJ27325; KNO; MGC74745; COL18A1; COIA1_HUMAN; Antiangiogenic agent; COIA1_HUMAN; COL15A1; COL18A1; Collagen alpha 1(XV) chain; Collagen alpha-1(XV) chain; Collagen type XV proteoglycan; Collagen type XVIII alpha 1; Collagen XV, alpha 1 polypeptide; Collagen, type XV, alpha 1; Endostatin; Endostatin XV; FLJ34914; FLJ38566; KNO1; KS; Multi functional protein MFP; OTTHUMP00000021782; OTTHUMP00000115472; OTTHUMP00000115473.
交叉反應(yīng):Rat
抗體來(lái)源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Endostatin
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號(hào)：None
理論分子量：190 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
該抗體特異性結(jié)合內(nèi)皮抑素，內(nèi)皮抑素是強(qiáng)效內(nèi)源性血管生成抑制因子，可抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移與新生血管形成。該抗體可檢測(cè)內(nèi)皮抑素表達(dá)水平，評(píng)估機(jī)體血管生成抑制狀態(tài)；同時(shí)可中和其活性，解除血管生成抑制，促進(jìn)血管新生，助力研究缺血損傷、腫瘤血管抑制機(jī)制。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：膠原 XVIII 水解產(chǎn)生的內(nèi)源性血管抑制因子，特異性抑制內(nèi)皮增殖、遷移、管腔形成，阻滯腫瘤新生血管生長(zhǎng)，無(wú)明顯細(xì)胞毒性。
抗體作用原理：靶向成熟 Endostatin 活性片段抗原位點(diǎn)，識(shí)別內(nèi)源水解產(chǎn)物與外源重組內(nèi)皮抑素蛋白。
產(chǎn)品特點(diǎn)：適配藥效學(xué)檢測(cè)，可定量給藥后組織、血清藥物濃度；用于抗腫瘤血管生成藥效評(píng)價(jià)、傷口愈合、視網(wǎng)膜血管增生研究。
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核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過(guò)夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒(méi)在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過(guò)夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹(shù)膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過(guò)夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長(zhǎng)根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過(guò)夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過(guò)夜。
檢測(cè)：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取OD值。
關(guān)鍵字： 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體;Rabbit;190 kDa;
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