本試劑盒基于間接ELISA檢測原理,微孔板固相包被人血管內(nèi)皮抑素特異性抗原,加入待測樣本與標(biāo)準(zhǔn)品后,樣本中的ES-Ab抗體與固相抗原特異性結(jié)合,孵育洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì),加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人二抗進(jìn)行特異性結(jié)合,底物顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測樣本中ES-Ab抗體的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2520 |
英文名稱 | ES-Ab ELISA Kit 96T/48T | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:血清 1:80 稀釋可檢出陽性抗體
檢測范圍:定性陰陽性判定,無定量濃度區(qū)間
反應(yīng)時間:37℃孵育 124min,二抗 77min,顯色 23min
保存條件:2~8℃避光保存,避免試劑長時間敞口揮發(fā)
顯色系統(tǒng):TMB 顯色體系,硫酸終止反應(yīng)
檢測波長:450nm+630nm 雙波長校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:無定量曲線,通過 Cutoff 臨界值判斷樣本抗體陰陽性
注意事項:使用內(nèi)皮抑素靶向藥物治療患者,體內(nèi)易產(chǎn)生該抗體,需記錄用藥史再判讀結(jié)果
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑盒室溫平衡 28min,稀釋一步法酶標(biāo)二抗工作液,設(shè)置陽性、陰性對照孔與待測血清孔。
所有孔預(yù)先加入酶結(jié)合液 50μL,對照孔加入對應(yīng)質(zhì)控試劑 50μL,樣本孔加稀釋血清 50μL,空白孔加稀釋緩沖液。
封板 37℃孵育 70min,棄液洗板 5 次,每次浸泡 34s,倒扣拍干微孔板。
分別添加顯色 A、B 液各 50μL,輕柔混勻微孔板。
避光 37℃顯色 16min。
加入終止液 50μL 終止顯色。
450nm 讀取吸光度,判定 ES-Ab 抗體水平。
關(guān)鍵字: 人血管內(nèi)皮抑素抗體;ES-Ab;ELISA試劑盒;
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