本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術原理，固相載體包被大鼠ES特異性抗體，樣本及標準品中的ES抗原與抗體特異性免疫結合，加入酶標記二抗后形成免疫復合物，催化底物顯色，顏色深淺對應ES含量，通過吸光度讀數(shù)及標準曲線換算實現(xiàn)定量檢測。
基本參數(shù)?：

產品名稱：大鼠內皮抑素(ES)ELISA試劑盒

英文名稱：ES ELISA Kit
貨號：Y-E1448

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測濃度小于0.1ng/mL，可精準捕捉樣本中微量ES表達差異，無交叉干擾檢測下限。

檢測范圍：0.15ng/mL - 10ng/mL，覆蓋大鼠血清、組織勻漿、細胞上清液中ES常規(guī)表達濃度區(qū)間。

反應時間：整體實驗操作耗時90分鐘，包括樣本孵育30分鐘、酶標孵育30分鐘、顯色反應15分鐘、終止穩(wěn)定15分鐘。

保存條件：試劑盒未開封狀態(tài)2-8℃冷藏保存，嚴禁冷凍；開封后板條密封避光2-8℃存放，避免受潮污染。

有效期：未開封原裝試劑盒有效期6個月，嚴格按保存條件存放可保證全程性能穩(wěn)定。

顯色系統(tǒng)：采用TMB單組分顯色液，過氧化物酶催化特異性顯色，底色干凈、顯色梯度清晰，無雜色干擾。

檢測波長：主檢測波長450nm，參比波長630nm，雙波長校正降低孔底雜質、氣泡帶來的檢測誤差。

標準曲線繪制：以標準品濃度為橫坐標，對應OD值為縱坐標，采用四參數(shù)Logistic擬合方程繪制標準曲線，擬合度R2≥0.990。

特異性：僅特異性識別大鼠內皮抑素(ES)，與大鼠其他同源細胞因子、血管調控因子無交叉反應，特異性準確率100%。

重復性：板內變異系數(shù)CV≤8%，板間變異系數(shù)CV≤10%，批次間檢測數(shù)據(jù)穩(wěn)定性高、重復性良好。

注意事項：實驗所有試劑需提前平衡至室溫（20-25℃）；避免試劑交叉污染，槍頭、孵育耗材一次性使用；顯色反應需嚴格避光，終止后15分鐘內完成上機檢測。
關鍵注意事項：

本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。

全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。

移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。

孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。

洗板必須充分，殘液會造成非特異性結合，背景偏高。

終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結果失真。

終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。

實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。

不同批次試劑盒組分不可混用。

試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：

包被微孔板各孔添加梯度標準品 50μL，大鼠血清樣本 50μL，空白孔補稀釋緩沖液。

每孔加入酶結合檢測液 100μL，封板膜封閉，37℃孵育 60min。

洗板液加滿微孔靜置 25s，棄液拍干，重復洗滌 5 次。

避光依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，混勻后避光顯色 15min。

每孔加入終止液 50μL 終止反應，晃動微孔板混勻體系。

酶標儀 450nm 讀取 OD 數(shù)值，剔除異常孔讀數(shù)。

換算內皮抑素濃度，檢測血管抑制因子水平。
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