磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體
原理特點
該抗體特異性識別ERK5蛋白特異性磷酸化修飾位點，僅結(jié)合活化狀態(tài)的ERK5激酶。細胞外信號調(diào)節(jié)激酶5是MAPK信號通路重要亞型，其磷酸化活化可介導(dǎo)細胞增殖、分化、應(yīng)激應(yīng)答與血管生成，該抗體可精準檢測ERK5的磷酸化活化水平，反映MAPK-ERK5通路激活狀態(tài)；同時可封閉磷酸化活性位點，阻斷激酶下游信號傳導(dǎo)，抑制細胞應(yīng)激活化與異常增殖，助力研究細胞應(yīng)激損傷、腫瘤增殖、血管重塑機制。
英文名稱:phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220) Rabbit pAb
中文名稱:磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體
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Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:ERK5(phospho T218+Y220); ERK5(phospho Thr218+Tyr220); Big MAP kinase 1; BMK 1; BMK 1 kinase; BMK-1; BMK1; BMK1 Kinase; EC 2.7.11.24; ERK 4; ERK 5; ERK4; Extracellular Signal Regulated Kinase 5; Extracellular signal-regulated kinase 5; MAP kinase 7; MAPK 7; MAPK7; Mitogen Activated Protein Kinase 7; Mitogen-activated protein kinase 7; MK07_HUMAN; OTTHUMP00000065906; OTTHUMP00000065907; PRKM 7; PRKM7; PROTEIN KINASE, MITOGEN-ACTIVATED, 7.
交叉反應(yīng):Human,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human ERK5 around the phosphorylation site of Thr218 + Tyr220
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：90 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
靶點背景：ERK5 為獨立 MAPK 亞型，調(diào)控內(nèi)皮保護、心肌肥大、細胞生存，應(yīng)激與生長因子刺激下特異性磷酸化激活。
抗體原理：ERK5 專屬磷酸化基序肽免疫，與 ERK1/2 無交叉識別。
產(chǎn)品特點：心血管內(nèi)皮、心肌細胞模型專屬，研究血管保護、高血壓心肌肥厚通路機制。
樣本處理標(biāo)準流程
1. 細胞樣本制備
洗滌：用預(yù)冷PBS輕貼細胞表面洗滌2-3次，避免用力沖洗導(dǎo)致細胞脫落。
固定與通透：4℃預(yù)冷的4%多聚甲醛固定15-20分鐘；如需檢測胞內(nèi)蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室溫通透10-15分鐘。
封閉：用5% BSA或10%胎牛血清室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合。
2. 組織樣本制備
石蠟切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分鐘）脫蠟水化；檸檬酸緩沖液（pH6.0）熱修復(fù)10-15分鐘，自然冷卻至室溫。
新鮮組織：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小時，或-80℃冷凍保存；冷凍切片厚度控制在5-10μm，貼片后自然干燥30分鐘。
3. WB蛋白樣本制備
用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑）冰上裂解細胞30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清。
BCA法或Bradford法定量蛋白濃度，調(diào)整至上樣量一致；加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘變性，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
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