臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)說(shuō)明書

貨號(hào): C01460

規(guī)格: 50mL/100mL

保存: RT，有效期12個(gè)月

產(chǎn)品說(shuō)明:

臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲(chóng)藍(lán)，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率，是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。臺(tái)盼藍(lán)染色后，通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時(shí)間只需 3-5 分鐘，操作簡(jiǎn)單。

使用說(shuō)明:

1. 收集細(xì)胞：

用胰酶和/或 EDTA 消化貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞可直接收集。收集細(xì)胞時(shí)用1000-2000rpm離心1分鐘，棄上清，制備單細(xì)胞懸液，并做適當(dāng)稀釋。

2. 臺(tái)盼藍(lán)染色：

細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以9:1比例混勻（終濃度0.04%），染色3分鐘 (染色3分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠，但染色時(shí)間可以更長(zhǎng)一些，但不宜超過(guò)10分鐘) 。

3. 細(xì)胞計(jì)數(shù)：

吸取少量經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大，無(wú)光澤；活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài)，有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量，每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500個(gè)細(xì)胞。

細(xì)胞存活率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×100%

注意事項(xiàng):

1、 染色時(shí)間不能太長(zhǎng)，否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色，使檢測(cè)結(jié)果偏低。

2、 有潛在致癌危險(xiǎn)，為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。