天狼星紅染色液說明書 

貨號：R02445

規(guī)格：100mL/500mL

保存：RT 避光，有效期1年。

產(chǎn)品說明： 

膠原纖維(Collagen Fiber)是結(jié)締組織中分布最廣含量最多的一種纖維，廣泛分布于各種臟器， 其中皮膚、鞏膜、肌腱最豐富。天狼星紅與其襯染液都是強(qiáng)酸性染料，易與膠原分子中的堿性基團(tuán) 結(jié)合，吸附牢固。偏振光鏡檢測，膠原纖維有正的單軸雙折光性的屬性，與天狼星紅復(fù)合染色液結(jié)合后，可增強(qiáng)雙折射，提高分辨率，從而區(qū)分兩型膠原纖維。 

自備材料：

  10%的福爾馬林固定液；普通光學(xué)顯微鏡或偏振光顯微鏡；Weigert鐵蘇木素染色液；0.5%醋酸水溶液

操作說明：（僅供參考，請注意本操作有所改動(dòng)，客戶可根據(jù)自己具體實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行。） 

石蠟切片：

1. 組織固定于10%福爾馬林固定液，常規(guī)脫水包埋。

2. 切片厚度 6μm，常規(guī)脫蠟至水。

3. Weigert鐵蘇木素染色液染色10-20min。

4. 自來水洗5-10min，蒸餾水洗一次。

    不進(jìn)行核染色時(shí)，蘇木素染色步驟可省略。

5. 天狼星紅染色液染1h （片子較少時(shí)建議滴染，染色時(shí)間可依據(jù)具體實(shí)驗(yàn)效果優(yōu)化10min-30min或更短時(shí)間）

6.  不經(jīng)水洗，快速用0.5%醋酸水溶液快速洗30秒(紅色背景較深時(shí)用)。

7. 蒸餾水洗30s。

8.  用95%和100%乙醇脫水，透明，中性樹膠封固。

冰凍切片（一般不建議使用）：

1. 取材后需立即置于超低溫冰箱或液氮中保存

2. 樣本冰凍切片后，立即入10%福爾馬林（或4%多聚甲醛）中固定冷凍切片30分鐘

2. 蒸餾水沖洗2min×3

3. 染色步驟與石蠟切片相同

4. 使用酸化水分化

染色結(jié)果： 

普通光學(xué)顯微鏡： 膠原纖維    紅色 

                 細(xì)胞核      藍(lán)色或藍(lán)褐色

                 肌纖維      黃色 

偏振光顯微鏡： Ⅰ型膠原纖維    強(qiáng)橙黃色或亮紅色 

                 Ⅲ 型膠原纖維   綠色 

注意事項(xiàng)： 

1、為使在偏振光鏡下顯示清晰，本法的切片厚度以6～7μm為宜。 

2、本法染色穩(wěn)定，不易褪色 

3、石蠟切片烤片不影響染色

4、有文獻(xiàn)表明冰凍切片染色會比石蠟切片偏紅一些

5、一般50ml溶液大約可染50-100張片子

6、不染蘇木素的時(shí)背景可能會有雜染屬于正?，F(xiàn)象

7、染色不均勻，可能是染色過程中出現(xiàn)干片的原因，應(yīng)防止染料沉積

8、染色注意避光，試劑中PA成分對光敏感

9、使用前將染液放置室溫平衡，搖晃溶液后使用，確保溶劑達(dá)到室溫溶解狀態(tài)。

10、用Weigert鐵蘇木素染液染細(xì)胞核，可不受天狼星紅染液的影響。

11、聲明：產(chǎn)品非質(zhì)量問題（產(chǎn)品批次間會存在細(xì)微的差異，例如顏色、性狀等）可在訂貨日起一個(gè)月內(nèi)無理由退換；質(zhì)量問題處理原則以產(chǎn)品本身價(jià)值為限，不承擔(dān)其他連帶責(zé)任。

12、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

13、本品為飽和溶液，收到產(chǎn)品請放置RT，防止飽和成分析出影響