水稻內(nèi)源PLD基因探針法qPCR試劑盒（不含內(nèi)參）產(chǎn)品及特點：
主要用于檢測水稻及水稻制品中內(nèi)源 Gos9 基因的含量，可應(yīng)用于科研機構(gòu)、種子公司、食品檢測實驗室等。用于水稻品種鑒定、種子純度分析、食品中轉(zhuǎn)基因成分檢測等方面。通過檢測 Gos9 基因的表達水平，還可研究水稻在不同生長發(fā)育階段、不同環(huán)境條件下的基因表達調(diào)控機制。它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，分析靈敏性高，可以達到 100 拷貝/反應(yīng)。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)水稻內(nèi)源PLD基因DNA 高度保守區(qū)設(shè)計，不會跟其他的 DNA 發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 既可用于定性檢測，又可用于定量檢測。用于定量時其線性范圍不少于 5 個數(shù)量級。
6. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 PCR 反應(yīng)。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研。
規(guī)格及成分：
成分 | 編號 | 規(guī)格 | 包裝材料 |
2×Probe qPCR MasterMix | 試劑一 | 0.5 mL | 0.5 mL 本色蓋 |
熒光 PCR 專用模板稀釋液 | 試劑二 | 1 mL | 1.5 mL 綠色蓋 |
超純水 | 試劑三 | 1 mL | 1.5 mL 藍色蓋 |
水稻內(nèi)源PLD基因qPCR引物-探針混合液 | 試劑四 | 150 μL | 0.5 mL 棕色管 |
水稻內(nèi)源PLD基因qPCR陽性對照 (1×10E7 拷貝/μL) | 試劑五 | 50 μL | 0.5 mL 黃色蓋 |
使用手冊 |
| 一份 | 無 |
運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。
自備試劑 樣品 DNA。
GMO元件pUbi探針法qPCR試劑盒（不含內(nèi)參）使用方法：
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E1-10E6 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2，1。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，最好用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 6 號管中加入 5μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 5 號管中加入 5μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 4 號管中加入 5μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E4 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 如果有 N 個樣品，最好設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 上步所得 4 號稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的起始體積一樣，以此作為
PC。另外用水作為 NC。
8. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)樣品 DNA 提取試劑盒兼容。也可以選購本公司的免提取核酸釋放劑。
三、Probe qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個
用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6個用于標準曲線。如果做定性分析并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+4 個 PCR管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于 PCR 陽性對照（直接用第 6 步第 4 號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后最后加）：
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照 | 標準曲線樣品管 （1-6 管） |
2×Probe qPCR MasterMix | 各 10μL | 10μL | 各 10μL |
水稻內(nèi)源PLD基因qPCR 引物-探針混合液 | 各 3μL | 3μL | 各 3μL |
N+2 個待測 DNA 樣本 | 各 7μL | 不加 | 不加 |
超純水 | 不加 | 7μL | 不加 |
第 6 步所得標準曲線樣品稀釋液 （1-6 號） | 不加 | 不加 | 各 7μL（1 號樣 到 1 號管，2 號 樣到 2 號管…） |
11. 蓋上蓋子后上機，按下面參數(shù)進行 PCR：
過程 | 溫度 | 時間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應(yīng) （45 個循環(huán)） | 95℃ | 15 sec |
60℃ | 1 min（采集 FAM 通道的熒 光信號，3`BHQ1 為淬滅基 團） |
四、數(shù)據(jù)處理
12. 如果把本試劑盒用于定量檢測，則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標準曲線上推算出樣品 DNA濃度的 log 值，再推算出其濃度。
13. 如果把本試劑盒用于定性檢測，只判斷陽性或陰性，則陰性對照 Ct 必須沒有數(shù)值，或者 Ct 值等于或者大于 40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長，有典型擴增曲線，Ct 值應(yīng)該小于 40。對待測樣品，如果其 Ct 小于 40 則為陽性。如果沒有 Ct 值，或大于或等于 40 則為陰性。
僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途，不為任何個人提供產(chǎn)品和服務(wù)。以實際收貨產(chǎn)品說明書為準，網(wǎng)站說明書僅供參考。
關(guān)鍵字： 水稻內(nèi)源PLD基因探針法qPCR試劑盒; 水稻內(nèi)源PLD基因探針法qPCR試劑盒;PCR熒光蛋白試劑盒;實時熒光PCR檢測法;雅吉PCR試劑盒;
上海雅吉生物科技的核心業(yè)務(wù)主要圍繞生命科學(xué)研究所需的各類試劑、細胞、抗體及技術(shù)服務(wù)展開，具體可歸納為以下幾個方面：
細胞產(chǎn)品與技術(shù)平臺：
細胞產(chǎn)品：提供包括正常細胞、腫瘤細胞、腫瘤耐藥細胞在內(nèi)的多種細胞系。同時，公司也是美國ScienCell等品牌的原代細胞產(chǎn)品的代理商。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建服務(wù)：公司具備豐富的蛋白表達研究經(jīng)驗，能夠為客戶提供從基因序列到穩(wěn)定細胞株交付的一站式定制服務(wù)，應(yīng)用于基因功能研究、藥物篩選和重組蛋白生產(chǎn)等領(lǐng)域。
科研試劑：這是公司的基礎(chǔ)和優(yōu)勢業(yè)務(wù)。產(chǎn)品線全面覆蓋了分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)和微生物學(xué)等多個學(xué)科。
ELISA試劑盒：提供人、大鼠、小鼠、犬、魚、雞、牛等多種物種以及植物的ELISA檢測試劑盒，在國內(nèi)眾多重點實驗室中廣泛使用并被科研文獻引用。生化試劑、抗體與血清：提供包括一抗、二抗、單克隆/多克隆抗體在內(nèi)的多種抗體產(chǎn)品，以及胎牛血清等細胞培養(yǎng)用血清。
蛋白研究相關(guān)試劑盒：提供超過300種針對不同樣本來源（動物、植物、微生物）和不同細胞器（如線粒體、外泌體）的蛋白提取及檢測試劑盒。