本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，將純化的大鼠MTL抗體包被于酶標(biāo)板微孔作為固相載體。待測(cè)樣本中的MTL抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，隨后加入酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成穩(wěn)定的夾心復(fù)合物，洗滌去除未結(jié)合成分后，加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色。樣本中MTL濃度越高，顯色產(chǎn)物越多，吸光度值越高，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)測(cè)定大鼠樣本中胃動(dòng)素的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒

英文名稱：MTL ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1380

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤8pg/mL

檢測(cè)范圍：15pg/mL - 600pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：全程100分鐘，孵育50分鐘，顯色35分鐘

保存條件：2-8℃避光密封保存，洗滌液室溫保存即可

有效期：未開封10個(gè)月，開蓋后20天內(nèi)用完

特異性：特異性識(shí)別大鼠胃動(dòng)素，與促胃液素、膽囊收縮素?zé)o交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%

注意事項(xiàng)：樣本需空腹采集，進(jìn)食會(huì)導(dǎo)致MTL水平波動(dòng)；樣本采集后及時(shí)離心，避免蛋白吸附管壁。
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒所有試劑室溫放置 24min，配制 MTL 標(biāo)準(zhǔn)品梯度，待測(cè)上清樣本稀釋，空白孔補(bǔ)稀釋液，每孔加樣 50μL。

直接加入酶標(biāo)記結(jié)合液 50μL，封板封口，37℃孵育 56min。

洗板 5 次，每次浸泡 27s，棄液后拍干板條。

每孔加顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 14min。

加入終止液 50μL 混勻終止顯色。

450nm 酶標(biāo)儀讀取并保存 OD 數(shù)據(jù)。

依托標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算胃動(dòng)素濃度，還原樣本原始含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：