本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，酶標(biāo)板包被有大鼠CA199特異性捕獲抗體。檢測(cè)時(shí)，樣本、標(biāo)準(zhǔn)品中的CA199抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的CA199檢測(cè)抗體，形成夾心免疫復(fù)合物。經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，顯色深淺與樣本中CA199含量呈正相關(guān)，通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，可定量檢測(cè)大鼠CA199的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒
英文名稱(chēng)：Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1359
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤1.2U/mL
檢測(cè)范圍：2U/mL - 80U/mL
反應(yīng)時(shí)間：全程120分鐘，孵育60分鐘，酶孵育30分鐘，顯色30分鐘
保存條件：2-8℃冷藏保存，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃分裝凍存，避免反復(fù)凍融
有效期：原裝有效期12個(gè)月，開(kāi)封試劑30天內(nèi)有效
特異性：特異性結(jié)合大鼠CA199抗原，與CEA、CA125等腫瘤標(biāo)志物無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤4%，板間CV≤6%
注意事項(xiàng)：炎癥、黃疸樣本可能存在輕微干擾，需設(shè)置空白對(duì)照；加樣精準(zhǔn)度直接影響結(jié)果，需規(guī)范加樣操作。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
微孔板室溫平衡 30min，梯度稀釋 CA199 標(biāo)準(zhǔn)品，血清樣本稀釋處理，空白孔加稀釋液，每孔上樣 50μL。
每孔加入 CA199 酶標(biāo)抗體 50μL，密封酶標(biāo)板，37℃避光孵育 72min。
洗板 6 次，每次洗滌液浸泡 40s，倒扣拍凈微孔內(nèi)殘留液體。
加入顯色 A、B 液各 50μL，輕微震蕩混勻，37℃顯色 21min。
快速加入終止液 50μL 終止底物反應(yīng)。
酶標(biāo)儀 450nm 波長(zhǎng)檢測(cè) OD 吸光度。
標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算稀釋后濃度，乘以稀釋倍數(shù)得到樣本 CA199 濃度。
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關(guān)鍵字： 大鼠胃腸癌標(biāo)志物;CA199;ELISA試劑盒;
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