本試劑盒針對田鼠布魯氏菌特異性核酸靶點研發(fā)，采用PCR擴增檢測技術(shù)，可精準檢測田鼠組織、臟器、環(huán)境樣本中的病原菌核酸。田鼠布魯氏菌是自然疫源性人獸共患病原，可通過鼠類傳播感染畜禽與人類，試劑盒特異性極強，可精準區(qū)分其他布魯氏菌種。適用于野外疫源地監(jiān)測、養(yǎng)殖環(huán)境鼠源布魯氏菌排查、疫病溯源及自然疫源性疾病防控研究。
產(chǎn)品名稱 | 田鼠布魯氏菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013957 |
英文名稱 | Brucella microtiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
針對田鼠布魯氏菌特異性脂蛋白基因設(shè)計探針，qPCR 專一檢出嚙齒動物源該型布魯氏菌。
普通 PCR 擴增田鼠布魯氏菌特有核糖體基因，電泳與家畜布魯氏菌條帶大小區(qū)分。
鼠臟器組織 DNA 提純后多重 PCR，同步篩查田鼠布魯氏菌與其他嚙齒類致病菌。
?操作步驟?：
1. DNA提取（樣本制備區(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標準曲線制備（獨立操作區(qū)）
標記6管為梯度稀釋點（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋，混勻后作為標準品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設(shè)置：預變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標準曲線計算樣本濃度。
?注意事項?：
1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴格劃分三個獨立區(qū)域：?試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?，各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴禁混用?，防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭；
陽性對照操作應(yīng)在專用生物安全柜中進行，避免污染其他試劑；
加樣后立即蓋緊管蓋，避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?，避免反復凍融，確保穩(wěn)定性；
使用前于冰上解凍并輕柔混勻，瞬時離心后使用。
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關(guān)鍵字： 田鼠布魯氏菌;PCR檢測試劑盒;
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