本試劑盒采用一步法RT-PCR技術(shù)，專為犬冠狀病毒核酸檢測研發(fā)，可適配犬糞便、腸道拭子、嘔吐物樣本中的病毒RNA檢測。犬冠狀病毒是犬腹瀉、胃腸炎的主要致病病毒，傳播速度快，幼犬易感，試劑盒檢測快速、靈敏度高，可早期排查隱性感染。適用于寵物醫(yī)院臨床確診、犬舍批量疫病篩查、疫情溯源及犬消化道病毒病防控。
產(chǎn)品名稱 | 犬冠狀病毒PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013984 |
英文名稱 | Canine Corona Virus(CCoV)RTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
犬腹瀉糞便 RNA 一步法 RT-qPCR，靶向冠狀病毒 S 刺突蛋白基因，探針熒光判定病毒陽性。
巢式 RT-PCR 兩輪擴(kuò)增病毒 RdRp 復(fù)制酶基因，微量糞便病毒穩(wěn)定檢出。
多重腸道病毒 RT-PCR，同步篩查犬冠狀病毒、犬細(xì)小病毒兩種腹瀉病原。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 犬冠狀病毒;PCR檢測試劑盒;
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