本試劑盒專為水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域研發(fā)，基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，特異性檢測(cè)斑點(diǎn)叉尾鮰病毒核酸，適配鮰魚鰓組織、肝胰臟、水體等樣本。斑點(diǎn)叉尾鮰病毒是危害鮰魚養(yǎng)殖的核心病原，發(fā)病快、死亡率高，幼苗感染損失慘重，傳統(tǒng)檢測(cè)難以實(shí)現(xiàn)早期預(yù)警。本試劑盒檢測(cè)下限低、靈敏度優(yōu)異，可精準(zhǔn)檢出早期隱性感染樣本，快速完成疫病確診，助力水產(chǎn)養(yǎng)殖從業(yè)者提前防控、阻斷疫情擴(kuò)散，廣泛應(yīng)用于鮰魚育苗檢疫、養(yǎng)殖日常疫病監(jiān)測(cè)、水產(chǎn)疫情溯源排查。
產(chǎn)品名稱 | 斑點(diǎn)叉尾鮰病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014001 |
英文名稱 | Channel Catfish Virus(CCV)PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
魚組織樣本病毒 DNA 提取，靶向病毒 ORF89 基因特異性引物普通 PCR，電泳條帶判定鮰魚病毒感染。
水生動(dòng)物專用 qPCR 熒光探針?lè)ǎ瑪U(kuò)增同步熒光采集，定量魚脾臟、腎臟內(nèi)斑點(diǎn)叉尾鮰病毒拷貝數(shù)。
熱啟動(dòng)熒光 PCR，抑制水體雜菌、魚細(xì)胞 DNA 非特異性擴(kuò)增，減少水產(chǎn)樣本檢測(cè)假陽(yáng)性。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無(wú)核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽(yáng)性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無(wú)擴(kuò)增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測(cè)或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項(xiàng)?：
所有耗材必須無(wú)核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸取；
陽(yáng)性模板拷貝濃度高，開(kāi)蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過(guò) 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測(cè)，禁止人體臨床檢測(cè)；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長(zhǎng)期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字： 斑點(diǎn)叉尾鮰病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;
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