本試劑盒為卡氏枝孢霉專屬真菌檢測試劑，采用PCR擴增技術(shù)，靶向檢測卡氏枝孢霉特異性核酸片段，適配環(huán)境樣本、飼料樣本、畜禽病變組織樣本?？ㄊ现︽呙故浅Ｒ娢廴拘哉婢讓?dǎo)致飼料霉變、養(yǎng)殖環(huán)境真菌污染，可引發(fā)畜禽皮膚、呼吸道真菌感染。本試劑盒特異性強，可精準(zhǔn)區(qū)分卡氏枝孢霉與其他枝孢霉及真菌，檢測快速、操作便捷，無需復(fù)雜真菌培養(yǎng)流程，適用于飼料質(zhì)檢、養(yǎng)殖環(huán)境真菌污染監(jiān)測、畜禽真菌病病因確診等場景。
產(chǎn)品名稱 | 卡氏枝孢霉PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014020 |
英文名稱 | Cladosporium carrioniiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
霉變飼料、皮膚病灶真菌 DNA 提取，卡氏枝孢霉 ITS 間隔區(qū)特異性引物 PCR，電泳條帶判定霉菌。
熒光探針 qPCR，靶向卡氏枝孢霉核糖體基因，區(qū)分枝孢霉屬其他近緣霉菌。
真菌熱裂解 PCR 體系，試劑盒高溫裂解液釋放霉菌基因組，消除多糖雜質(zhì)對擴增的抑制。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴增。
?注意事項?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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