本試劑盒針對(duì)絲狀網(wǎng)尾線蟲(chóng)保守基因設(shè)計(jì)特異性PCR擴(kuò)增體系，可精準(zhǔn)檢測(cè)畜禽樣本中的絲狀網(wǎng)尾線蟲(chóng)核酸。產(chǎn)品分辨度高，可有效區(qū)分絲狀網(wǎng)尾線蟲(chóng)與其他肺線蟲(chóng)，適配反芻動(dòng)物呼吸道、糞便樣本，適用于畜禽呼吸道線蟲(chóng)病的臨床診斷和養(yǎng)殖疫病監(jiān)測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 絲狀網(wǎng)尾線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014097 |
英文名稱 | Dictyocaulus filariaPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
靶向絲狀網(wǎng)尾線蟲(chóng) HSP70 基因，反芻動(dòng)物肺組織核酸 PCR 特異性檢測(cè)。
SYBR Green 定量擴(kuò)增蟲(chóng)體核糖體間隔區(qū)，熔解曲線區(qū)分安氏、絲狀網(wǎng)尾線蟲(chóng)。
肺部病灶研磨釋放蟲(chóng)體 DNA，特異性引物擴(kuò)增特征條帶判定陽(yáng)性。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽(yáng)性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)；
陰性：無(wú)Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽(yáng)性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過(guò) 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開(kāi)蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過(guò)期禁止使用
僅限科研檢測(cè)，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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