本試劑盒采用網(wǎng)尾線蟲屬通用基因擴增技術(shù)，可廣譜檢測安氏網(wǎng)尾線蟲、絲狀網(wǎng)尾線蟲等各類致病網(wǎng)尾線蟲核酸。試劑盒通用性強、篩查范圍廣，特異性無交叉反應(yīng)，適合反芻動物養(yǎng)殖大批量樣本初篩、區(qū)域病原分布調(diào)研工作。
產(chǎn)品名稱 | 網(wǎng)尾線蟲通用PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014098 |
英文名稱 | Dictyocaulus spp.PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
網(wǎng)尾線蟲屬共有 18S rRNA 保守基因，牛羊糞便廣譜篩查全部致病肺線蟲。
屬通用熒光探針 qPCR，一次性檢出安氏、絲狀等各類網(wǎng)尾線蟲核酸。
糞便蟲卵富集提取 DNA，通用引物擴增保守間隔基因，初篩肺線蟲感染。
?操作步驟?：
DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容的核酸提取試劑盒純化樣本DNA，確保無抑制劑殘留。
標準曲線制備（樣本制備區(qū)）
標記6支離心管為7至2號，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用帶濾芯槍頭）。
梯度稀釋陽性對照：
7號管：加入5 μL 1×10^8拷貝/μL陽性對照，震蕩混勻，得1×10^7拷貝/μL標準品；
依次稀釋至2號管，最終濃度跨5個數(shù)量級（1×10^7至1×10^3拷貝/μL）。
所有標準品置于冰上備用，避免反復(fù)凍融。
試劑配制（試劑準備區(qū)）
反應(yīng)液避光解凍后渦旋混勻，短暫離心分裝至PCR管。
每反應(yīng)體系20 μL，含預(yù)混引物、熒光染料及緩沖液。
加樣（樣本處理區(qū)）
分別加入5 μL待測DNA或標準品至反應(yīng)管，陰性對照以DEPC-H2O替代。
蓋緊管蓋，避免氣泡干擾。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
按以下程序運行定量PCR儀：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)階段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析（可選）。
?注意事項?：
試劑盒含生物源性質(zhì)粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，陽性模板僅在生物安全柜開蓋；
所有一次性耗材、PCR 廢液、電泳凝膠實驗后 121℃高壓滅菌再丟棄；
試劑避免反復(fù)凍融，單次融化冰上放置不超過 2 h，使用完畢立即放回 - 20℃；
移液器吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸取，防止交叉污染；
試劑盒僅用于科研檢測，嚴禁人臨床體外診斷；
擴增產(chǎn)物區(qū)產(chǎn)物不可帶回試劑、提取區(qū)，防止氣溶膠大面積污染實驗室；
若陰性對照持續(xù)出現(xiàn)雜帶，全部更換全新試劑盒，實驗室臺面、移液器紫外過夜消毒。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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鮭魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒 | 雞CD8分子ELISA試劑盒 |
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